8 檢驗(yàn)規(guī)則
8.1 檢驗(yàn)分類
產(chǎn)品交貨時(shí)進(jìn)行的檢驗(yàn)。
新產(chǎn)品鑒定或國家質(zhì)檢機(jī)構(gòu)質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)。
8.2 檢驗(yàn)項(xiàng)目
型式檢驗(yàn)的檢驗(yàn)項(xiàng)目按
8.3 判定規(guī)則
a) 檢驗(yàn)結(jié)果符合
b) 雜菌率不符合指標(biāo),但液體樣品雜菌率不超過10%,固體樣品雜菌率不超過20%,在10-6根瘤菌平板上無霉菌出現(xiàn),其他各項(xiàng)指標(biāo)符合,也可判為合格產(chǎn)品;
c) 在pH值、水分、吸附劑顆粒細(xì)度、外觀和氣味等次要檢測項(xiàng)目中,有兩項(xiàng)不符合技術(shù)指標(biāo),但活菌數(shù)及雜菌率符合指標(biāo)要求,也可判為合格產(chǎn)品。
a) 根瘤菌活菌數(shù)不符合技術(shù)指標(biāo),判為不合格產(chǎn)品;
b) 液體樣品雜菌率超過10%,固體樣品雜菌率超過20%,判為不合格品;
c) 在10-6根瘤菌培養(yǎng)基平板上出現(xiàn)霉菌判為不合格產(chǎn)品;
d) 小粒種子用的根瘤菌肥,吸附劑通過孔徑
9 包裝、標(biāo)識、運(yùn)輸和貯存
9.1 包裝
液體肥料小包裝用塑料瓶或玻璃瓶,大包裝用塑料桶。固體肥料用不透明聚乙烯塑料袋包裝。
外包裝采用紙箱,紙箱質(zhì)量應(yīng)符合GB/T 6543要求。箱外用尼龍打包帶加固。
9.2 標(biāo)識
在包裝箱(袋) 上印有產(chǎn)品名稱、商標(biāo)、標(biāo)準(zhǔn)編號、肥料登記證號、生產(chǎn)單位、廠址、生產(chǎn)日期、批號和凈重,并印有防曬、防潮、防凍等標(biāo)記,若有必要還要加印易碎、防倒置等標(biāo)記。內(nèi)包裝上有產(chǎn)品名稱、商標(biāo)、標(biāo)準(zhǔn)編號、肥料登記證號、有效菌含量、生產(chǎn)日期、有效期、產(chǎn)品性能、使用說明書及生產(chǎn)單位、廠址等。
根瘤菌肥料的產(chǎn)品名稱與產(chǎn)品中根瘤菌的名稱應(yīng)符合。例如:用大豆根瘤菌生產(chǎn)的肥料,其產(chǎn)品名稱為大豆根瘤菌肥料。
在產(chǎn)品性能中應(yīng)標(biāo)明產(chǎn)品可接種的豆科寄主名稱。
9.3 運(yùn)輸和貯存
根瘤菌肥料的運(yùn)輸和貯存按NY411-2000中9.3和9.4執(zhí)行。
附錄A
(標(biāo)準(zhǔn)的附錄)
革蘭氏染色
革蘭氏染色陽性細(xì)菌與革蘭氏染色陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁,對結(jié)晶紫-碘復(fù)合物的滲透性不同,而形成染色陽性或染色陰性反應(yīng)。
A1 染劑
A1.1 結(jié)晶紫液(赫克爾Hucker氏配方)
甲液:結(jié)晶紫
乙醇(95%) 20mL
乙液:草酸鍍
蒸餾水 80mL
甲、乙液相混合,靜置48h后使用。此染液較穩(wěn)定,在不透氣的暗色瓶中可儲存數(shù)月。A1.2 盧哥(Lugol)氏碘液
碘(I)片 Ig
碘化鉀(KI)
蒸餾水 300mL
先用少量(3~5mL)蒸館水溶解碘化鉀,再投入碘片,待碘全溶后,加水稀釋。此染液穩(wěn)定,在不透氣的暗色瓶中可存數(shù)月。
A1.3 脫色液(95%的乙醇)
A1.4 復(fù)染液(0.5%的番紅水溶液)
取
A2 涂片
A2.1 在無油跡的干凈載片上用蠟筆劃好格,片端注明日期、片號。
A2.2 在載片上的每個(gè)格內(nèi)滴一小滴無菌水或蒸餾水。用接種環(huán)挑取少許菌苔,于水滴邊緣輕輕涂幾下。
A2.3 自然風(fēng)干或微熱促其快干,干后在火焰上通過1~2次,以固定涂片。
A3 染色步驟
3.1 滴加結(jié)晶紫液,覆蓋約1min。
A3.2 用水沖凈結(jié)晶紫液。
A3.3 滴加碘液沖去殘水。并覆蓋約1min。
3.4 用水沖去碘液,將片上水甩凈或用濾紙吸干。
3.5 將片傾斜,并襯以白背景,流滴95%酒精液約20~30s。立即用水沖凈酒精。
3.6 用番紅液染1~2(或更長)min。
A3.7 用水洗凈番紅,用濾紙吸干表面水或風(fēng)干,備鏡檢。
A4 觀察結(jié)果
用顯微鏡油鏡直接在載玻片上檢查。紅色為革蘭氏染色陰性,藍(lán)紫色為革蘭氏染色陽性。
A5 注意事項(xiàng)
A5.1 革蘭氏染色的配方很多,但染色成功與否,很大程度上取決于經(jīng)驗(yàn)。在沒有把握時(shí),最好在同一載玻片上,用大腸桿菌和金黃色葡萄球菌作為革蘭氏染色陰性和陽性的對照菌。
A5.2 革蘭氏染色操作中,以涂片和脫色兩步最為重要。涂片切不可過于濃厚。對于易于乳化的細(xì)菌,將沾有菌苔的接種環(huán)在水滴邊緣輕輕涂一二下即可。鏡檢時(shí),以分散開的細(xì)菌的革蘭氏染色反應(yīng)為準(zhǔn)。過于密集的細(xì)菌,常常呈假陽性。對純細(xì)菌的涂片,以95%乙醇脫色易于掌握。乙醇中含有更多的水分,則脫色力加強(qiáng),易形成假陰性。要盡量減少載玻片上的殘水。只是甩凈或用乙醇沖去殘水,以脫色20s為宜,用濾紙吸凈殘水,可用乙醇脫色近30s。A5.3 用火焰固定時(shí)不可過熱,以載玻片不燙手為宜。過熱會使染色反應(yīng)不正確。實(shí)際上對斜面純細(xì)菌涂片,風(fēng)干后不經(jīng)火焰固定即可染色。
A5.4 建議復(fù)染液用0.5%番紅液。其他復(fù)染液,如稀釋的石碳酸復(fù)紅液等,可根據(jù)具體情況選用。
A5.5 由于龍膽紫不是單一成分的染料,與結(jié)晶紫不同,按前述配方染色后,常常不易脫色,出現(xiàn)假陽性。遇到這種情況可將染色劑稀釋后使用。試用的龍膽紫稀釋成十分之一的濃度可以使用,但顏色仍然不如結(jié)晶紫。
A5.6 對一般容易生長的異養(yǎng)細(xì)菌,以檢查培養(yǎng)18~24h的菌為宜。革蘭氏染色陰性細(xì)菌的染色反應(yīng)穩(wěn)定,不易受菌齡的影響。革蘭氏染色陽性細(xì)菌的染色反應(yīng),有的受菌齡的影響:較幼的細(xì)胞,培養(yǎng)18~24h或更短的,呈陽性反應(yīng),較老的細(xì)胞,培養(yǎng)24h或48h以上的細(xì)胞,則部分或全部細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)殛幮苑磻?yīng)。區(qū)分革蘭氏染色反應(yīng)時(shí)應(yīng)注意。
