摘  要：為篩選防治紅麻炭疽病的高效殺菌劑，采用生長速率法和凹玻片法室內(nèi)測定5種殺菌劑對(duì)紅麻炭疽病菌菌絲生長和孢子萌發(fā)的毒力，選擇其中3種效果較好的藥劑進(jìn)行田間藥效試驗(yàn)。結(jié)果表明：咪鮮胺、吡唑醚酯和苯醚甲環(huán)唑?qū)t麻炭疽病菌菌絲生長和孢子萌發(fā)的抑制效果較好，菌絲的EC50分別為0.0880、0.1205和0.5136μg·mL^-1，孢子萌發(fā)的EC50分別為0.1230、0.1658和0.8987μg·mL^-1。以25%咪鮮胺乳油900mL·hm^-2劑量(用水量為450kg·hm^-2)對(duì)紅麻葉面進(jìn)行噴施，對(duì)紅麻炭疽病田間防效達(dá)94.34%，且使紅麻單株纖維重較對(duì)照顯著增加15.92%。這一研究可為紅麻炭疽病的防治提供參考。

關(guān)鍵詞：紅麻；炭疽病；殺菌劑；毒力測定；田間防治

紅麻(Hibiscus cannabinus)又名洋麻、槿麻，為錦葵科木槿屬一年生草本纖維作物，是麻紡和造紙工業(yè)的重要原料^[1]。因我國耕地資源不足，麻類種植總面積不斷下滑，目前約8萬hm²，纖維產(chǎn)量約22萬t，但麻紡和其他多用途產(chǎn)業(yè)需求卻持續(xù)增加^[2]。近年研究^[3]發(fā)現(xiàn)麻等纖維類作物具生物量大、環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)、經(jīng)濟(jì)價(jià)值高等優(yōu)點(diǎn)，且對(duì)重金屬鎘離子有較強(qiáng)的吸收和富集能力。因此，發(fā)展紅麻產(chǎn)業(yè)對(duì)造紙工業(yè)和土壤鎘污染修復(fù)具有重要意義。紅麻皮可加工成替代塑料的紅麻地膜以及在水稻、油菜機(jī)插育秧中應(yīng)用的育秧膜。紅麻主要受立枯病(Rhizoctonia solani Kuhn)、炭疽病(Colletorichum hibisci Pol)和根結(jié)線蟲(Meloidogyne javanica)等病蟲危害^[4]，其中炭疽病為豫南地區(qū)紅麻的主要病害之一。信陽地區(qū)紅麻種植面積約0.8萬hm²，炭疽病給當(dāng)?shù)丶t麻產(chǎn)業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失^[5]。目前國內(nèi)對(duì)紅麻炭疽病化學(xué)防治研究較少，僅有少數(shù)藥劑對(duì)炭疽病菌菌絲生長的室內(nèi)抑制、紅麻種子浸種、土壤消毒等報(bào)道^[6-8]，而對(duì)孢子萌發(fā)的影響研究至今未見報(bào)道。咪鮮胺、吡唑嘧菌酯等藥劑對(duì)葡萄、南瓜等作物^[9-10]炭疽病的防效較好，但用于田間防治紅麻炭疽病的效果有待研究。

本研究通過對(duì)5種殺菌劑防治紅麻炭疽病的室內(nèi)毒力及田間藥效測定，探究其對(duì)紅麻皮鮮重和纖維產(chǎn)量的影響，并篩選對(duì)紅麻炭疽病防效較好且可促進(jìn)其部分農(nóng)藝性狀的藥劑，以期為紅麻炭疽病的防治提供參考。

1材料與方法

1.1供試菌株

紅麻炭疽病病株樣本采自信陽市農(nóng)業(yè)科學(xué)院陸廟試驗(yàn)基地，由海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所王會(huì)芳課題組分離、純化病原菌，參照文獻(xiàn)^[11]標(biāo)準(zhǔn)鑒定為黑線炭疽菌(Colletotrichum dematium)，并依據(jù)科赫氏法則^[12]進(jìn)行了驗(yàn)證。

1.2供試藥劑

25%咪鮮胺乳油(四川潤爾科技公司)，250g·L^-1嘧菌酯懸浮劑(英國先正達(dá)公司)，10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑(英國先正達(dá)公司)，70%甲基硫菌靈可濕性粉劑(濟(jì)南天邦化工公司)，250g·L^-1吡唑醚菌酯乳油(浙江新農(nóng)化工公司)。

1.3藥劑對(duì)菌絲生長的影響

采用生長速率法^[13]，略加改進(jìn)。以無菌水將每種藥劑分別配制成5個(gè)梯度濃度，每個(gè)濃度吸取5mL加入45mLPDA培養(yǎng)基(無菌水、馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂質(zhì)量比為50∶10∶1∶1)中，每個(gè)濃度3次重復(fù)，以無菌水為對(duì)照(CK)；將已純化的炭疽病菌菌餅(直徑8mm)接入各PDA平板中，置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中保濕培養(yǎng)。待CK菌絲長滿平板后，用十字交叉法測量各平板中菌株直徑，計(jì)算藥劑對(duì)菌絲的抑制率、毒力回歸方程、EC50、決定系數(shù)R2和95%置信限。

1.4藥劑對(duì)孢子萌發(fā)的影響

采用凹玻片法^[14]，略加改進(jìn)。將菌種接入馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基(無菌水、馬鈴薯、葡萄糖質(zhì)量比為50∶10∶1)中，25℃、180r·min-1振蕩培養(yǎng)5~7d，期間菌液產(chǎn)孢，將孢子懸浮液濃度調(diào)至1×106個(gè)·mL-1。以無菌水為溶劑配制藥液，每種藥劑設(shè)5個(gè)梯度濃度。將1.5%葡萄糖溶液、藥液和菌懸液按體積比1∶1∶1混勻，以無菌水替代藥液為對(duì)照(CK)，每個(gè)濃度3次重復(fù)。參照NYT1156.1-2006準(zhǔn)則將上述混合菌液滴在雙孔凹玻片上，25℃保濕培養(yǎng)，當(dāng)CK孢子萌發(fā)率(萌發(fā)標(biāo)準(zhǔn)為孢子芽管長度超過其最大直徑的1/2)≥90%時(shí)，統(tǒng)計(jì)各處理孢子萌發(fā)數(shù)，計(jì)算孢子萌發(fā)抑制率、毒力回歸方程、EC50、決定系數(shù)R2和95%置信限。

1.5藥劑對(duì)紅麻炭疽病的田間藥效

1.5.1試驗(yàn)田概況

試驗(yàn)田位于河南信陽市平橋區(qū)信陽市農(nóng)業(yè)科學(xué)院陸廟試驗(yàn)基地，紅麻為多年連作，炭疽病為田間自然發(fā)病。紅麻品種為雜紅992，2023年6月7日露地播種，播種量15.0kg·hm^-2，田間水肥正常管理。

1.5.2田間藥效試驗(yàn)

7月17日對(duì)紅麻炭疽病發(fā)病情況進(jìn)行調(diào)查，選取室內(nèi)試驗(yàn)防效較好的3種殺菌劑(咪鮮胺、吡唑醚菌酯和苯醚甲環(huán)唑)，依據(jù)使用說明選擇防治炭疽病推薦的最高和最低用藥劑量(表3)，用電動(dòng)噴霧器(3WBD-20型，臺(tái)州市澤園玉豐噴霧器廠)對(duì)紅麻進(jìn)行葉面噴施。試驗(yàn)采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，每小區(qū)面積20m²，設(shè)25%咪鮮胺乳油(900、450mL·hm^-2)、10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑(300、180mL·hm^-2)、250g·L^-1吡唑醚菌酯乳油(450、225mL·hm^-2)和CK共7個(gè)處理(用水量為450kg·hm^-2)，每處理4次重復(fù)。藥后7d調(diào)查病害發(fā)生情況，并進(jìn)行第2次施藥，7d后再次進(jìn)行病害調(diào)查。每小區(qū)隨機(jī)選擇5點(diǎn)取紅麻50片葉，參照NYT1464.7-2007準(zhǔn)則的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)調(diào)查發(fā)病情況，計(jì)算病情指數(shù)和防效。

1.6藥劑對(duì)紅麻產(chǎn)量的影響

9月28日收獲紅麻時(shí)，每小區(qū)隨機(jī)選擇3點(diǎn)取樣，每點(diǎn)選取5株代表性紅麻植株，稱量每株紅麻皮鮮重及鮮皮曬干后纖維重量。

2結(jié)果與分析

2.1藥劑對(duì)菌絲生長的抑制作用

由表1可知，5種藥劑對(duì)紅麻炭疽菌菌絲生長均有一定的抑制作用。抑制作用最好的是咪鮮胺，EC50為0.0880μg·mL^-1；其次是吡唑醚菌酯(EC50為0.1205μg·mL^-1)和苯醚甲環(huán)唑(EC50為0.5136μg·mL^-1)；效果最差的是嘧菌酯(EC50為0.8197μg·mL^-1)和甲基硫菌靈(EC50為45·0000μg·mL^-1)。

表1 5種藥劑對(duì)菌絲生長的抑制作用

2.2藥劑對(duì)孢子萌發(fā)的抑制作用

由表2可見，5種藥劑對(duì)紅麻炭疽菌孢子萌發(fā)均有一定的抑制作用。抑制作用最好的是咪鮮胺，EC50為0.1230μg·mL^-1；其次為吡唑醚菌酯和苯醚甲環(huán)唑，EC50分別為0.1658、0.8987μg·mL^-1；效果最差的是嘧菌酯和甲基硫菌靈，EC50分別為1.1758、72.6724μg·mL^-1。5種藥效對(duì)孢子萌發(fā)抑制效果與菌絲基本一致。

表2 5種藥劑對(duì)孢子萌發(fā)的抑制作用

2.3 3種藥劑對(duì)紅麻炭疽病的田間防效

由表3可見，經(jīng)過2次施藥，3種藥劑高、低劑量處理后紅麻炭疽病病情指數(shù)均呈下降趨勢，且第2次施藥后病情指數(shù)低于第1次。各藥劑在田間對(duì)紅麻炭疽病均有一定的防治效果。

第1次施藥后7d，咪鮮胺高、低劑量處理對(duì)紅麻炭疽病田間防效最好(防效分別為86.48%、83.90%)，其次是吡唑醚菌酯高、低劑量處理(分別為78.46%、76.08%)，防效最差的是苯醚甲環(huán)唑高、低劑量處理(分別為58.27%、57.54%)，其中咪鮮胺和苯醚甲環(huán)唑各處理防效差異顯著。

第2次施藥后7d，咪鮮胺高、低劑量處理防效(分別為94.34%、92.46%)最好，其次是吡唑醚菌酯高、低劑量處理(分別為83.79%、80.18%)，防效最差是苯醚甲環(huán)唑高、低劑量處理(分別為71.66%、70.53%)；其中咪鮮胺、吡唑醚菌酯、苯醚甲環(huán)唑各處理間防效差異顯著，且同一藥劑的高劑量處理防效均好于低劑量處理，但兩者差異不顯著。

表3 3種藥劑對(duì)紅麻炭疽病的田間防效^*

*同列不同小寫字母數(shù)值間差異顯著(P<0.05)。

2.4 3種藥劑對(duì)紅麻產(chǎn)量的影響

由表4可見，施藥后單株紅麻鮮皮重和纖維重均有提高。就紅麻單株鮮皮重而言，與CK相比，咪鮮胺處理增產(chǎn)最多，高、低劑量處理增重分別為16.08%、14.42%，其次為吡唑醚菌酯(分別為8.72%、7.24%)和苯醚甲環(huán)唑處理(分別為4.74%、3.50%)。但上述各處理與CK差異均不顯著，且每種藥劑單株纖維重增加在高、低劑量處理間差異亦不顯著。就紅麻纖維重而言，咪鮮胺高、低劑量處理較CK增產(chǎn)最多(分別為15.92%、14.50%)，其次為吡唑醚菌酯(分別為7.67%、6.72%)和苯醚甲環(huán)唑處理(分別為3.77%、3.42%)。咪鮮胺高、低劑量處理單株纖維重與CK差異顯著，但高、低劑量處理間無顯著差異。

表4 3種藥劑對(duì)紅麻產(chǎn)量的影響^*

*同列不同小寫字母數(shù)值間差異顯著(P<0.05)。

3討論

咪鮮胺是咪唑類廣譜殺菌劑，通過抑制甾醇的生物合成而損壞菌體細(xì)胞功能，對(duì)姜黃、八角、核桃等炭疽菌均有很好的防效，抑制其菌絲生長的EC50均小于0.1μg·mL^-1[14-16]。唐冬蘭等^[17]研究發(fā)現(xiàn)0.3μg·mL^-1咪鮮胺對(duì)草莓炭疽病分生孢子萌發(fā)的抑制率達(dá)99.86%。李少卡等^[18]用20%苯甲咪鮮胺和50%多菌靈復(fù)配，對(duì)荔枝炭疽病的田間防效達(dá)84.48%。曾向萍等^[4]研究發(fā)現(xiàn)菌絲的最適生長溫度為25℃，最適pH為7，在完全黑暗的環(huán)境下菌絲無法生長，在碳源培養(yǎng)基(碳源為淀粉、麥芽糖和甘油)和氮源培養(yǎng)基(氮源為酵母浸膏、牛肉浸膏、蛋白胨、硝酸鉀、硝酸鈉)上菌絲生長最快。上述結(jié)果為炭疽菌生物學(xué)研究和病害防治措施探索提供了借鑒。

王會(huì)芳等^[6]通過測定9種藥劑對(duì)紅麻炭疽菌室內(nèi)毒力發(fā)現(xiàn)，咪鮮胺錳鹽的EC50為0.0443μg·mL-1，抑制菌絲效果最好，25%吡唑醚菌酯乳油、10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑、12.5%腈菌唑乳油也表現(xiàn)出較好的菌絲抑制效果，本研究與此結(jié)果基本一致。

陳玉森等^[7]研究發(fā)現(xiàn)紅麻種子消毒和土壤滅菌可降低苗期炭疽病的發(fā)生。萬青山等^[8]以50%甲基托布津1250倍液對(duì)紅麻種子浸種處理，對(duì)紅麻苗期炭疽病防效可達(dá)75.08%，且對(duì)種子發(fā)芽勢、發(fā)芽率、出苗率和幼苗長勢均未發(fā)現(xiàn)不良影響。本研究中咪鮮胺、吡唑醚菌酯和苯醚甲環(huán)唑等藥劑田間防治紅麻炭疽病效果顯著，對(duì)紅麻單株鮮皮重和纖維含量亦未產(chǎn)生不良影響，且顯著增加單株纖維含量。紅麻是一種天然纖維材料，產(chǎn)量高、價(jià)格低廉、生產(chǎn)周期短、環(huán)?？稍偕?/font>，可作為塑料填充料、紡織原料、生物質(zhì)能源、建材纖維板、紙漿、活性碳等[19]，因此，保證紅麻植株健康生長尤為重要。綜上，本研究結(jié)果可為紅麻炭疽病的防治及栽培管理提供理論參考。