摘 要：本發(fā)明涉及一種羅布麻葉中的黃酮苷類化合物制備方法和用途，該方法將羅布麻葉藥材用乙醇回流提取，經(jīng)大孔樹脂富集后得羅布麻葉總黃酮提取物，再經(jīng)聚酰胺柱分離以及中試制備液相色譜分離，獲得較純的單體化合物為槲皮素?3?O?（6″?丙二?；?，β，?D?葡萄糖苷。經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明所獲得的述羅布麻葉中黃酮苷類化合物槲皮素?3?O?（6″?丙二?；?，β，?D?葡萄糖苷具有抗炎作用，作為抗炎活性功效的保健品具有很好的應(yīng)用前景。
1.一種羅布麻葉中的黃酮苷化合物制備方法，其特征在于按下列步驟進(jìn)行：
a、取羅布麻葉藥材，加入5?15倍量體積的30?70%乙醇水溶液，在溫度95℃回流提取1?3次，每次提取1?3h，提取后過濾，合并提取液，濃縮至無醇味，得到提取物；
b、將步驟a得到的提取物，使用大孔樹脂進(jìn)行黃酮類成分的富集，上樣濃度為0.1?0.3g/mL，藥材樹脂體積比為1:5?1:10，上樣流速為1BV/h?3BV/h，用水洗脫1?3個(gè)柱體積，除去水溶性雜質(zhì)，洗脫液為2?5倍體積的30%?70%乙醇，收集洗脫液，真空干燥后得羅布麻總黃酮有效部位提取物；
c、稱取步驟b得到的有效部位提取物，使用聚酰胺填料進(jìn)行柱分離，上樣量與聚酰胺用量質(zhì)量比為1:20?1:40，洗脫溶劑為體積濃度10%?90%乙醇，梯度洗脫，收集50%?90%乙醇洗脫液，并在溫度50℃下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，真空干燥，得到槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷粗提物；
d、將步驟c得到槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷粗提物加入甲醇溶解，再經(jīng)中試反相色譜柱色譜分離，色譜條件為：體積比18:82的乙腈?0.1%甲酸水為流動相，流速180mL/min，溫度室溫，保留時(shí)間為18?20min，最后分離得到羅布麻葉中的黃酮苷類化合物，化學(xué)名稱：槲皮素?3?O?（6″?丙二?；?β?D?葡萄糖苷。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的羅布麻葉中的黃酮苷類化合物槲皮素?3?O?（6″?丙二?；?β?D?葡萄糖苷在制備抗炎活性功效的保健品中的用途。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種羅布麻葉黃酮苷類化合物制備方法和用途。
背景技術(shù)
炎癥(inflammation)：具有血管系統(tǒng)的活體組織對損傷因子所發(fā)生的防御反應(yīng)為炎癥。血管反應(yīng)是炎癥過程的中心環(huán)節(jié)。非甾體類抗炎藥(NSAIDs)在臨床上仍為首選用于炎癥，在我國其消耗量僅次于抗感染藥。但是，NSAIDs有諸多的不良反應(yīng)，尤其對消化系統(tǒng)的影響最大。羅布麻葉Apocynum venetum L .為夾竹桃科多年生宿根草本植物羅布麻的干燥葉?！吨袊幍洹分惺蛰d羅布麻葉為常用中藥，其味甘、苦、性涼，具有平肝安神，清熱利水之功效。
羅布麻廣泛用于食物和藥物中，為不可多得的天然藥用植物資源，藥理研究表明羅布麻葉具有降血壓、降血脂、鎮(zhèn)靜、利尿、抗衰老、增強(qiáng)免疫力等作用。本課題組研究表明槲皮素?3?O?(6″?丙二酰基)?β?D?葡萄糖苷在羅布麻葉中的活性好，且含量較高，所以通過分離純化的手段得到槲皮素?3?O?(6″?丙二?；??β?D?葡萄糖苷并對其活性進(jìn)行研究的工作具有重要的意義。槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷是一種黃酮苷類化合物，且至今尚未見關(guān)于槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷針對抗炎活性的報(bào)道。
本發(fā)明目的在于，提供一種羅布麻葉中黃酮苷類化合物的制備方法和用途，該方法將羅布麻葉藥材用乙醇回流提取，經(jīng)大孔樹脂富集后得羅布麻葉總黃酮提取物，再經(jīng)聚酰胺柱分離以及中試制備液相色譜分離，獲得較純的單體化合物為槲皮素?3?O?(6″?丙二?；??β?D?葡萄糖苷。經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明所述羅布麻葉中黃酮苷類化合物具有抗炎作用，作為具有抗炎活性功效的保健品，具有很好的應(yīng)用前景。
本發(fā)明所述的一種羅布麻葉中的黃酮苷化合物的制備方法，按下列步驟進(jìn)行：
a、取羅布麻葉藥材，加入5?15倍量體積的30?70％乙醇水溶液，在溫度95℃回流提取1?3次，每次提取1?3h，提取后過濾，合并提取液，濃縮至無醇味，得到提取物；
b、將步驟a得到的提取物，使用大孔樹脂進(jìn)行黃酮類成分的富集，上樣濃度為0.1?0.3g/mL，藥材樹脂體積比為1:5?1:10，上樣流速為1BV/h?3BV/h，用水洗脫1?3個(gè)柱體積，除去水溶性雜質(zhì)，洗脫液為2?5倍體積的30％?70％乙醇，收集洗脫液，真空干燥后得羅布麻總黃酮有效部位提取物；
c、稱取步驟b得到的有效部位提取物，使用聚酰胺填料進(jìn)行柱分離，上樣量與聚酰胺用量質(zhì)量比為1:20?1:40，洗脫溶劑為體積濃度10％?90％乙醇，梯度洗脫，收集50％?90％乙醇洗脫液，并在溫度50℃下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，真空干燥，得到槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷粗提物；
d、將步驟c得到槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷粗提物加入甲醇溶解，再經(jīng)中試反相色譜柱色譜分離，色譜條件為：乙腈?0.1％甲酸水18:82為流動相，流速180mL/min，溫度室溫，保留時(shí)間為18?20min，最后分離得到羅布麻葉中的黃酮苷類化合物，化學(xué)名稱：槲皮素?3?O?(6″?丙二酰基)?β?D?葡萄糖苷。
所述羅布麻葉中的黃酮苷類化合物槲皮素?3?O?(6″?丙二?；??β?D?葡萄糖苷在制備具有抗炎活性功效的保健品中的用途。
本發(fā)明所述的一種羅布麻葉中的黃酮苷類化合物的制備方法，該方法中化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：
其中：化學(xué)名稱為槲皮素?3?O?(6″?丙二酰基)?β?D?葡萄糖苷。
通過本發(fā)明所述方法獲得的羅布麻葉中的黃酮苷類化合物槲皮素?3?O?(6″?丙二?；??β?D?葡萄糖苷在保健品中的應(yīng)用。經(jīng)藥理研究表明，本發(fā)明所提供羅布麻葉中的黃酮苷類化合物槲皮素?3?O?(6″?丙二酰基)?β?D?葡萄糖苷可顯著降低小鼠單核巨噬細(xì)胞(RAW264.7細(xì)胞)和小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞(BV2細(xì)胞)經(jīng)脂多糖刺激后一氧化氮(NO)的含量，降低脂多糖刺激后小鼠單核巨噬細(xì)胞(RAW264.7細(xì)胞)中的腫瘤壞死因子?α(TNF?α)和白介素?6(IL?6)含量。說明該化合物具有良好的抗炎作用。有望開發(fā)成新的具有抗炎活性功效的保健品。
附圖說明
圖1為本發(fā)明化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二酰基)?β?D?葡萄糖苷的HPLC圖譜；
圖1
圖2為本發(fā)明化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷的1HNMR圖譜；
圖2
圖3為本發(fā)明化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷的13CNMR圖譜；
圖3
圖4為本發(fā)明不同濃度的化合物對小鼠單核巨噬細(xì)胞(RAW264.7細(xì)胞)細(xì)胞活力的影響圖；
圖4
圖5為本發(fā)明不同濃度的化合物對脂多糖誘導(dǎo)的小鼠單核巨噬細(xì)胞(RAW264.7細(xì)胞)中一氧化氮(NO)、腫瘤壞死因子?α(TNF?α)和白介素?6(IL?6)含量的影響圖：A：對細(xì)胞中一氧化氮(NO)的影響；B：對細(xì)胞中腫瘤壞死因子?α(TNF?α)含量的影響；C：對細(xì)胞中白介素?6(IL?6)含量的影響；其中與模型組比****P<0.0001；***P<0.001；**P<0.01；*P<0.05；
圖5
圖6為本發(fā)明不同濃度化合物對小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞(BV2細(xì)胞)細(xì)胞活力的影響圖；
圖6
圖7為本發(fā)明不同濃度化合物對脂多糖誘導(dǎo)的小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞(BV2細(xì)胞)細(xì)胞中一氧化氮(NO)含量的影響圖，其中與模型組比****P<0.0001；***P<0.001；**P<0.01；*P<0.05。
圖7
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步詳細(xì)闡述本發(fā)明。
實(shí)施例1
化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷的制備：
a、取干燥的羅布麻葉藥材6kg，加入10倍量體積的濃度50％乙醇水溶液，在溫度95℃回流提取3次，每次提取1.5h，提取后過濾，合并提取液，濃縮至無醇味，得提取物2.2kg；
b、取步驟a得到的提取物300g，使用大孔樹脂進(jìn)行黃酮類成分的富集，上樣濃度為0.15g/mL，藥材樹脂體積比為1:5，上樣流速為2BV/h，用水洗脫1個(gè)柱體積，除去水溶性雜質(zhì)，洗脫液為3倍體積的50％乙醇，2倍體積的70％乙醇，收集洗脫液，真空干燥后得羅布麻總黃酮有效部位提取物70g；
c、稱取步驟b得到的羅布麻總黃酮有效部位提取物10g，使用聚酰胺填料進(jìn)行柱分離，上樣量與聚酰胺質(zhì)量比為1:40，洗脫溶劑為體積濃度10％?90％乙醇，梯度洗脫，收集60％?90％乙醇洗脫液，并在溫度50℃下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，真空干燥，得到槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷粗提物1.8g；
d、將步驟c得到槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷粗提物500mg加甲醇溶解，再經(jīng)中試反相色譜柱色譜分離，色譜條件為：體積比18:82的乙腈?0.1％甲酸水為流動相，流速180mL/min，溫度室溫，保留時(shí)間為18?20min，最后分離得到所述羅布麻葉中的黃酮苷化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷260mg；
實(shí)施例1得到黃酮苷化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷為黃綠色末狀固體，經(jīng)HPLC分析含量大于98％，如圖1所示，再經(jīng)1HNMR，13CNM結(jié)構(gòu)解析，如圖2、圖3所示，該化合物為槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷，該化合物的波譜數(shù)據(jù)：
1H?NMR(600MHz,DMSO?d6)d:3.09(2H,s,malonyl),3.18(1H,m,H?4″),3.25(1H,m,H?3″),3.26(1H,m,H?2″),3.32(1H,m,H?5″),4.00(1H,dd,J＝12.0,5.4Hz,H?6″),4.20(1H,d,J＝12.0Hz,H?6″),5.38(1H,d,J＝7.2Hz,H?1″),6.20(1H,d,J＝1.2Hz,H?6),6.40(1H,d,J＝1.2Hz,H?8),6.84(1H,d,J＝8.4Hz,H?5′),7.52(1H,brs,H?2′),7.52(1H,d,J＝8.4Hz,H?6′),12.59(1H,brs,5?OH)；[0030]13C?NMR(150MHz,DMSO?d6)d:41.2(CH2malonyl),63.6(C?6″),69.5(C?4″),73.9(C?2″,5″),76.2(C?3″),93.6(C?8),98.7(C?6),101.0(C?1″),103.9(C?10),115.2(C?2′),116.2(C?5′),121.0(C?1′),121.5(C?6′),133.2(C?3),144.8(C?3′),148.5(C?4′),156.3(C?9),156.6(C?2),161.2(C?5),164.2(C?7),166.6(COmalonyl),167.9(COmalonyl),177.3(C?4)。
實(shí)施例2
化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二酰基)?β?D?葡萄糖苷的制備：
a、取干燥的羅布麻葉藥材6kg，加入5倍量體積的濃度30％乙醇水溶液，在溫度95℃回流提取1次，提取1h，提取后過濾，合并提取液，濃縮至無醇味，得提取物2.0kg；
b、將取步驟a得到的提取物300g，使用大孔樹脂進(jìn)行黃酮類成分的富集，上樣濃度為0.3g/mL，藥材樹脂體積比為1:8，，上樣流速為1BV/h，用水洗脫2個(gè)柱體積，除去水溶性雜質(zhì)，洗脫液為2倍體積的30％乙醇，3倍體積的60％乙醇，收集洗脫液，真空干燥后得羅布麻總黃酮有效部位提取物68g；c、稱取步驟b得到的羅布麻總黃酮有效部位提取物12g，使用聚酰胺填料進(jìn)行柱分離，上樣量與聚酰胺質(zhì)量比為1:30，洗脫溶劑為體積濃度10％?90％乙醇，梯度洗脫，收集50％?90％乙醇洗脫液，并在溫度50℃下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，真空干燥，得到槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷粗提物2.0g；
d、將步驟c得到槲皮素?3?O?(6”?O?丙二酰基)?β?D?葡萄糖苷粗提物450mg加甲醇溶解，再經(jīng)中試反相色譜柱色譜分離，色譜條件為：體積比18:82的乙腈?0.1％甲酸水為流動相，流速180mL/min，溫度室溫，保留時(shí)間為18?20min，最后分離得到羅布麻葉中的黃酮苷化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷190mg。
實(shí)施例3
化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷的制備：
a、取干燥的羅布麻葉藥材6kg，加入15倍量體積的濃度70％乙醇水溶液，在溫度95℃回流提取2次，提取3h，提取后過濾，合并提取液，濃縮至無醇味，得提取物2.1kg；
b、將取步驟a得到的提取物300g，使用大孔樹脂進(jìn)行黃酮類成分的富集，上樣濃度為0.2g/mL，藥材樹脂體積比為1:10，上樣流速為3BV/h，用水洗脫3個(gè)柱體積，除去水溶性雜質(zhì)，洗脫液為3倍體積的70％乙醇，2倍體積的30％乙醇，收集洗脫液，真空干燥后得羅布麻總黃酮有效部位提取物66g；
c、稱取步驟b得到的羅布麻總黃酮有效部位提取物10g，使用聚酰胺填料進(jìn)行柱分離，上樣量與聚酰胺質(zhì)量比為1:20，洗脫溶劑為體積濃度10％?90％乙醇，梯度洗脫，收集50％?90％乙醇洗脫液，并在溫度50℃下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，真空干燥，得到槲皮素?3?O?(6”?O?丙二酰基)?β?D?葡萄糖苷粗提物1.8g；
d、將步驟c得到槲皮素?3?O?(6”?O?丙二酰基)?β?D?葡萄糖苷粗提物400mg加甲醇溶解，再經(jīng)中試反相色譜柱色譜分離，色譜條件為：體積比18:82的乙腈?0.1％甲酸水為流動相，流速180mL/min，溫度室溫，保留時(shí)間為18?20min，最后分離得到羅布麻葉中的黃酮苷化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷150mg。
實(shí)施例4
羅布麻葉中的黃酮苷類化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷對脂多糖刺激的小鼠單核巨噬細(xì)胞(RAW264.7細(xì)胞)的影響：
小鼠單核巨噬細(xì)胞(RAW264.7細(xì)胞)傳代后在含10％胎牛血清(FBS)的改良Eagle培養(yǎng)基(DMEM)中培養(yǎng)，將2×104個(gè)/孔單核巨噬細(xì)胞(RAW264.7)接種于96孔板培養(yǎng)24h，小鼠單核巨噬細(xì)胞(RAW264.7細(xì)胞)經(jīng)200?600μM的槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷處理后，除正常對照組外，其余各組均加入終濃度為1μg/mL的脂多糖，給藥后培養(yǎng)16h后，將細(xì)胞培養(yǎng)板取出處理，采用CCK?8法測定細(xì)胞存活率；收集細(xì)胞上清，用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)試劑盒檢測細(xì)胞上清腫瘤壞死因子?α(TNF?α)和白介素?6(IL?6)的含量。用亞硝酸鹽測定試劑盒(Griess法)檢測細(xì)胞上清中一氧化氮(NO)的含量，取各組細(xì)胞上清液50μL于96孔板中，每組做3個(gè)復(fù)孔，向每孔中加入Griess試劑Ⅰ和Griess試劑Ⅱ各50μL；用酶標(biāo)儀在540nm檢測吸光度；
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
如表1，圖4所示，在CCK?8試驗(yàn)中考察本發(fā)明提供的羅布麻葉中的黃酮苷類化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷孵育后對小鼠單核巨噬細(xì)胞(RAW264.7細(xì)胞)的細(xì)胞活力影響，結(jié)果顯示：該化合物在200μM，400μM，500μM，600μM的濃度范圍內(nèi)均不影響小鼠單核巨噬細(xì)胞(RAW264.7細(xì)胞)的細(xì)胞活力，為實(shí)驗(yàn)篩選合適藥物濃度提供參考；
表1 黃酮苷類化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二酰基)?β?D?葡萄糖苷對小鼠單核巨噬細(xì)胞(RAW264.7細(xì)胞)細(xì)胞存活率的影響：
如表2?表4，圖5所示，200?600μM的羅布麻葉中黃酮苷類化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷處理細(xì)胞后細(xì)胞中一氧化氮(NO)、腫瘤壞死因子?α(TNF?α)和白介素?6(IL?6)含量顯著降低，說明化合物黃酮苷類化合物物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷具有顯著抑制一氧化氮(NO)和炎癥因子生成的活性，對一氧化氮(NO)、腫瘤壞死因子?α(TNF?α)和白介素?6(IL?6)的抑制率最高分別可達(dá)到92 .65％、71 .13％和71 .70％，說明槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷具有顯著的抗炎活性；
表2 羅布麻葉中黃酮苷類化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷對脂多糖刺激的小鼠單核巨噬細(xì)胞(RAW264.7細(xì)胞)中一氧化氮(NO)含量的影響：
表3 羅布麻葉中黃酮苷類化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷對脂多糖刺激的小鼠單核巨噬細(xì)胞(RAW264.7細(xì)胞)中腫瘤壞死因子?α(TNF?α)含量的影響：
表4 羅布麻葉中黃酮苷類化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷對脂多糖刺激的小鼠單核巨噬細(xì)胞(RAW264.7細(xì)胞)中白介素?6(IL?6)含量的影響：
實(shí)施例5
羅布麻葉中黃酮苷類化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二酰基)?β?D?葡萄糖苷對脂多糖刺激的小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞(BV2細(xì)胞)細(xì)胞的影響：
小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞(BV2細(xì)胞)細(xì)胞傳代后在含10％胎牛血清(FBS)的改良Eagle培養(yǎng)基(DMEM)中培養(yǎng)，將6.5×104個(gè)/孔小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞(BV2細(xì)胞)細(xì)胞接種于24孔板，培養(yǎng)24h，小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞(BV2細(xì)胞)細(xì)胞經(jīng)50?400μM的槲皮素?3?O?(6”?O?丙二酰基)?β?D?葡萄糖苷處理后，除正常對照組外，其余各組均加入終濃度為1μg/mL的脂多糖，培養(yǎng)24h后，將細(xì)胞培養(yǎng)板取出處理；用亞硝酸鹽測定試劑盒(Griess)法檢測細(xì)胞上清中一氧化氮(NO)的含量，取各組細(xì)胞上清液50μL于96孔板中，每組做3個(gè)復(fù)孔，向每孔中加入Griess試劑Ⅰ和Griess試劑Ⅱ各50μL；用酶標(biāo)儀在540nm檢測吸光度，計(jì)算細(xì)胞上清一氧化氮(NO)的含量；
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
如表5，圖6所示，在CCK?8試驗(yàn)中考察本發(fā)明提供的羅布麻葉中黃酮苷類化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷孵育后對小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞(BV2細(xì)胞)細(xì)胞活力影響，結(jié)果顯示：該化合物在50μM,100μM,200μM,400μM的濃度范圍內(nèi)均不影響小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞(BV2細(xì)胞)的細(xì)胞活力，為實(shí)驗(yàn)篩選合適藥物濃度提供參考；
表5 羅布麻葉中黃酮苷類化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷對小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞(BV2細(xì)胞)細(xì)胞存活率的影響：
如表6，圖7所示，50?400μM的羅布麻葉中黃酮苷類化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷處理細(xì)胞后細(xì)胞中一氧化氮(NO)含量顯著降低，說明羅布麻葉中黃酮苷類化合物物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷具有顯著抑制一氧化氮(NO)生成的活性，在100μM濃度時(shí)一氧化氮(NO)抑制率可達(dá)43.19％，且隨著濃度提高其抑制率也隨之升高，當(dāng)濃度為400μM時(shí)，對一氧化氮(NO)含量的抑制率可達(dá)到94.21％，說明槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷具有顯著的抗炎活性；
表6 羅布麻葉中黃酮苷類化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二酰基)?β?D?葡萄糖苷對脂多糖刺激的小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞(BV2細(xì)胞)細(xì)胞中一氧化氮(NO)含量的影響：
本發(fā)明所述的黃酮苷類化合物槲皮素?3?O?(6”?O?丙二?；??β?D?葡萄糖苷可明顯降低脂多糖刺激的小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞(BV2細(xì)胞)細(xì)胞中一氧化氮(NO)含量，說明槲皮素?3?O?(6”?O?丙二酰基)?β?D?葡萄糖苷具有顯著的抗炎活性。具有抗炎活性功效的保健品中的用途。
