摘  要：本發(fā)明提供了一種脫羧原位萃取富集漢麻葉片中的大麻二酚的方法，包括：步驟1：將漢麻葉片進(jìn)行粉碎；步驟2：將粉碎后的漢麻葉片加入高濃乙醇中進(jìn)行低溫逆流萃取或浸泡攪拌得到大麻二酚醇提液；步驟3：對(duì)大麻二酚醇提液進(jìn)行乙醇回收；步驟4：對(duì)乙醇回收后的大麻二酚醇提液加水加熱進(jìn)行脫羧反應(yīng)；步驟5：設(shè)置回流裝置，在脫羧反應(yīng)后的大麻二酚醇提液在加熱湍動(dòng)的狀態(tài)下加入萃取劑進(jìn)行萃?。徊襟E6：對(duì)萃取后的大麻二酚合并有機(jī)相后減壓回收得到大麻二酚浸膏，將大麻二酚浸膏經(jīng)鍵和硅膠柱層析分離，結(jié)晶得到大麻二酚晶體。本發(fā)明通過含氯原子的數(shù)量的調(diào)控可實(shí)現(xiàn)化學(xué)極性可控，所得浸膏大麻二酚回收率高，且黏度大大降低，規(guī)?；a(chǎn)重復(fù)性好。

 

權(quán)利要求

1.一種脫羧原位萃取富集漢麻葉片中的大麻二酚的方法，其特征在于，所述一種脫羧原位萃取富集漢麻葉片中大麻二酚的方法是通過如下步驟實(shí)現(xiàn)的：

步驟1：將漢麻葉片進(jìn)行粉碎，得到粉碎后的漢麻葉片；

步驟2：將所述粉碎后的漢麻葉片加入高濃乙醇中進(jìn)行低溫逆流萃取或者浸泡攪拌得到大麻二酚醇提液；

步驟3：對(duì)所述大麻二酚醇提液進(jìn)行乙醇回收，得到乙醇回收后的大麻二酚醇提液；

步驟4：對(duì)所述乙醇回收后的大麻二酚醇提液進(jìn)行加水至大麻二酚醇提液體積分?jǐn)?shù)為50％-65％、加熱至85-105℃進(jìn)行脫羧反應(yīng)，得到脫羧反應(yīng)后的大麻二酚醇提液；

步驟5：設(shè)置回流裝置，并在所述脫羧反應(yīng)后的大麻二酚醇提液在加熱湍動(dòng)的狀態(tài)下加入萃取劑進(jìn)行萃取1-3h，將大麻二酚富集于有機(jī)相中，冷卻后進(jìn)行自然分層，得到萃取后的大麻二酚；

步驟6：對(duì)所述萃取后的大麻二酚合并有機(jī)相后減壓回收得到大麻二酚浸膏，并將所述大麻二酚浸膏經(jīng)鍵和硅膠柱層析分離后，結(jié)晶得到大麻二酚晶體。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種脫羧原位萃取富集漢麻葉片中的大麻二酚的方法，其特征在于，所述步驟2中粉碎后的漢麻葉片與高濃乙醇的體積比為1g：10-20mL，高濃乙醇的體積分?jǐn)?shù)為85％-95％。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種脫羧原位萃取富集漢麻葉片中的大麻二酚的方法，其特征在于，所述步驟2中低溫逆流萃取的溫度為-30-25℃，低溫逆流萃取的時(shí)間為1-4h。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種脫羧原位萃取富集漢麻葉片中的大麻二酚的方法，其特征在于，所述步驟2中浸泡攪拌的溫度為0-25℃，浸泡攪拌的時(shí)間為6-12h。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種脫羧原位萃取富集漢麻葉片中的大麻二酚的方法，其特征在于，所述步驟3中乙醇回收的體積為所述大麻二酚醇提液的1/3-3/4。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種脫羧原位萃取富集漢麻葉片中的大麻二酚的方法，其特征在于，所述步驟5中萃取劑包括含氯溶劑和提取液，含氯溶劑與提取液的體積比為1:1-3；

含氯溶劑為一氯甲烷、二氯甲烷、氯仿、一氯乙烷、二氯乙烷的其中一種。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種脫羧原位萃取富集漢麻葉片中的大麻二酚的方法，其特征在于，所述步驟5中萃取時(shí)間為1-3h，萃取溫度為85-105℃。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種脫羧原位萃取富集漢麻葉片中的大麻二酚的方法，其特征在于，所述步驟5中萃取方法為脫羧原位萃取法，萃取次數(shù)為1-4次。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種脫羧原位萃取富集漢麻葉片中的大麻二酚的方法，其特征在于步驟6中結(jié)晶得大麻二酚晶體的方法為：

將所述大麻二酚浸膏進(jìn)行復(fù)溶，將復(fù)溶后的大麻二酚浸膏經(jīng)C18烷基鏈鍵和硅膠柱進(jìn)行層析分離，將層析分離后的大麻二酚浸膏放入醚類溶劑中進(jìn)行結(jié)晶得到純度超過95％的大麻二酚晶體。

 

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于化合物提取技術(shù)領(lǐng)域，更具體地說，是涉及一種脫羧原位萃取富集漢麻葉片中的大麻二酚的方法。

 

背景技術(shù)

大麻二酚((-)-Cannabidiol)，簡稱CBD，分子式為C21H30O2，是一種從工業(yè)大麻中提取的天然化合物，性狀為白色至淡黃色樹脂或結(jié)晶，熔點(diǎn)為66℃-67℃，幾乎不溶于水，溶于乙醇、甲醇、乙醚、苯、氯仿等有機(jī)溶劑。

CBD具有阻斷某些多酚對(duì)人體神經(jīng)系統(tǒng)的不利影響，并且具有阻斷乳腺癌轉(zhuǎn)移。CBD可以幫助控制人類大腦中GABA神經(jīng)遞質(zhì)的消耗量，抑制大腦中樞興奮性，降低癲癇發(fā)作，還可以幫助提高其他抗癲癇藥物的療效。大麻二酚可與CB1受體作用，抑制中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)和RVM內(nèi)的γ-氨基丁酸，以及脊髓內(nèi)谷氨酸的釋放來達(dá)到鎮(zhèn)痛效果。CBD還可與CB2受體作用減弱神經(jīng)生長因子誘發(fā)的肥大細(xì)胞脫顆粒以及嗜中性粒細(xì)胞聚集來抑制過敏性炎癥，并由此介導(dǎo)免疫抑制作用，達(dá)到消炎止痛的效果，且效果強(qiáng)于人們所熟知和廣泛運(yùn)用的阿司匹林。CBD具有治療多發(fā)性硬化癥、抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、抗失眠等一系列生理活性，CBD能夠幫助內(nèi)源性大麻素維持在一個(gè)合理的水平，讓人身體感覺良好、愉悅，又不會(huì)像四氫大麻酚一樣成癮。

中國專利CN108314608B“一種大麻二酚的提取分離方法”采用醇提取后，堿性溶液增強(qiáng)大麻二酚的水溶性，用有機(jī)溶劑萃取富集大麻二酚，經(jīng)聚酰胺樹脂柱、中性氧化鋁和鍵合硅膠柱純化富集，結(jié)晶獲得高純度的大麻二酚。本發(fā)明專利技術(shù)采用堿性溶液污染環(huán)境，排放受阻，不便于大規(guī)模應(yīng)用。中國專利CN106278828A“一種從大麻中提取大麻二酚的方法”將大麻藥材粉末采用30-100％(V/V)的乙醇提??；將提取液濃縮得浸膏后水沉，去除雜質(zhì)得到水沉液；將水沉液離心并向獲得的沉淀中加入10-100％(V/V)乙醇，溶解得到沉淀物的醇溶液；將沉淀物的醇溶液進(jìn)行柱層析，在洗脫液中加入乙醇過飽和溶解，獲得結(jié)晶物干燥。本發(fā)明專利技術(shù)中的水沉操作會(huì)使水溶性不良的CBD沉降，降低CBD的回收率。中國專利CN103351373A“一種從漢麻中提取純化大麻二酚的方法技術(shù)”采用超臨界CO2萃取技術(shù)從漢麻成熟期花葉中提取大麻二酚成分，利用大孔吸附樹脂和快速純化系統(tǒng)對(duì)大麻二酚提取物進(jìn)一步純化，得到的大麻二酚產(chǎn)品含量超過98％，且不含有精神毒性成分四氫大麻酚。本發(fā)明專利技術(shù)產(chǎn)品收率高純度高，滿足了漢麻高附加值產(chǎn)品開發(fā)的需要，尤其在制藥領(lǐng)域具有非常大的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)。但超臨界萃取技術(shù)設(shè)備固定資產(chǎn)一次性投入很大，且設(shè)備處理量有限，不適合大規(guī)模生產(chǎn)。中國專利CN103351373A“一種微波輔助提取大麻二酚及其制備的方法技術(shù)”所述的大麻二酚的百分含量為≥95％，四氫大麻酚的含量未檢出。此發(fā)明專利技術(shù)解決了現(xiàn)有工藝提取時(shí)間長、效率低的問題，但微波輔助萃取技術(shù)設(shè)備固定資產(chǎn)一次性投入很大，且設(shè)備處理量有限，不適合大規(guī)模生產(chǎn)。中國專利CN110256206A“一種高速逆流色譜分離提取大麻二酚的方法”將工業(yè)大麻花葉干燥、粉碎，采用甲醇或乙醇提取大麻二酚，得到大麻二酚醇提液，用石油醚萃取并去除石油醚得萃取物，將萃取物采用高速逆流色譜法進(jìn)行分離，收集洗脫液濃縮、結(jié)晶獲得大麻二酚產(chǎn)品。此發(fā)明專利技術(shù)所用石油醚沸點(diǎn)不均一，回收難度大，且氣味較大，不適合大規(guī)模生產(chǎn)。

 

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種脫羧原位萃取富集漢麻葉片中的大麻二酚的方法，旨在解決現(xiàn)有技術(shù)中大麻二酚萃取時(shí)間長、回收率低的技術(shù)問題。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：提供一種脫羧原位萃取富集漢麻葉片中的大麻二酚的方法，包括：

步驟1：將漢麻葉片進(jìn)行粉碎，得到粉碎后的漢麻葉片；

步驟2：將粉碎后的漢麻葉片加入高濃乙醇中進(jìn)行低溫逆流萃取或者浸泡攪拌得到大麻二酚醇提液；

步驟3：對(duì)大麻二酚醇提液進(jìn)行乙醇回收，得到乙醇回收后的大麻二酚醇提液；

步驟4：對(duì)乙醇回收后的大麻二酚醇提液進(jìn)行加水至大麻二酚醇提液體積分?jǐn)?shù)為50％-65％、加熱至85-105℃進(jìn)行脫羧反應(yīng)，得到脫羧反應(yīng)后的大麻二酚醇提液；

步驟5：設(shè)置回流裝置，并在脫羧反應(yīng)后的大麻二酚醇提液在加熱湍動(dòng)的狀態(tài)下加入萃取劑進(jìn)行萃取1-3h，將大麻二酚富集于有機(jī)相中，冷卻后進(jìn)行自然分層，得到萃取后的大麻二酚；

步驟6：對(duì)萃取后的大麻二酚合并有機(jī)相后減壓回收得到大麻二酚浸膏，并將大麻二酚浸膏經(jīng)鍵和硅膠柱層析分離后，結(jié)晶得到大麻二酚晶體。

可選的，步驟2中粉碎后的漢麻葉片與高濃乙醇的體積比為1g：10-20mL，高濃乙醇的體積分?jǐn)?shù)為85％-95％。

可選的，步驟2中低溫逆流萃取的溫度為-30-25℃，低溫逆流萃取的時(shí)間為1-4h。

可選的，步驟2中浸泡攪拌的溫度為0-25℃，浸泡攪拌的時(shí)間為6-12h。

可選的，步驟3中乙醇回收的體積為大麻二酚醇提液的1/3-3/4。

可選的，步驟5中萃取劑包括含氯溶劑和提取液，含氯溶劑與提取液的體積比為1:1-3；

含氯溶劑為一氯甲烷、二氯甲烷、氯仿、一氯乙烷、二氯乙烷的其中一種。

可選的，步驟5中萃取時(shí)間為1-3h，萃取溫度為85-105℃。

可選的，步驟5中萃取方法為脫羧原位萃取法，萃取次數(shù)為1-4次。

可選的，步驟6中并將大麻二酚浸膏經(jīng)鍵和硅膠柱層析分離后，結(jié)晶得CBD晶體，包括：將大麻二酚浸膏進(jìn)行復(fù)溶，將復(fù)溶后的大麻二酚浸膏經(jīng)C18烷基鏈鍵和硅膠柱進(jìn)行層析分離，將層析分離后的大麻二酚浸膏放入醚類溶劑中進(jìn)行結(jié)晶得到純度超過95％的大麻二酚晶體。

本發(fā)明提供的一種脫羧原位萃取富集漢麻葉片中的大麻二酚的方法與系統(tǒng)的有益效果為：

(1)本發(fā)明高濃乙醇溶液低溫萃取能防止水溶性雜質(zhì)的溶出，提取物澄清透明。

(2)本發(fā)明高溫脫羧與液液萃取同時(shí)完成，不僅分子運(yùn)動(dòng)快節(jié)約萃取時(shí)間，而且節(jié)約有機(jī)溶劑的用量，含氯溶劑毒性小，安全系數(shù)高，價(jià)格便宜，分子量較大，分層良好，為回收有機(jī)溶劑降低成本。

(3)本發(fā)明通過含氯原子的數(shù)量的調(diào)控可實(shí)現(xiàn)化學(xué)極性可控，大麻二酚易于富集于有機(jī)相中，所得大麻二酚浸膏回收率高，且黏度大大降低，規(guī)?；a(chǎn)重復(fù)性好。

 

附圖說明

為了更清楚地說明本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案，下面將對(duì)實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實(shí)施例，對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。

圖1為本發(fā)明實(shí)施例提供的一種脫羧原位萃取富集漢麻葉片中的大麻二酚的方法的流程圖；

  

圖1

圖2為本發(fā)明實(shí)施例提供的大麻二酚和四氫大麻酚的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；

  

圖2

圖3為本發(fā)明實(shí)施例提供的大麻二酚標(biāo)準(zhǔn)品和漢麻葉提取液的高效液相色譜圖。

  

圖3

 

具體實(shí)施方式

為了使本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題、技術(shù)方案及有益效果更加清楚明白，以下結(jié)合附圖及實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。

實(shí)施例1

根據(jù)圖1-3對(duì)本實(shí)施例進(jìn)行說明，本發(fā)明提出的脫羧原位萃取富集漢麻葉片中的大麻二酚的方法具體步驟如下：

(1)取10.00g粉碎后漢麻葉片，以料液比1:10g/mL加入95％乙醇中，浸泡攪拌12h所得大麻二酚醇提液，所得提取液經(jīng)高效液相色譜檢測(cè)測(cè)得大麻二酚含量為32.97mg/g；

(2)減壓回收醇提液中部分乙醇后，加水至乙醇體積分?jǐn)?shù)為62％，再加入水相體積一半的二氯甲烷，105℃回流進(jìn)行脫羧原位萃取2.0h，冷卻后自然分層，大麻二酚富集于下層有機(jī)相中，此過程重復(fù)進(jìn)行兩次，合并有機(jī)相檢測(cè)CBD回收率為127％，減壓回收二氯甲烷得大麻二酚浸膏。

(3)95％的乙醇復(fù)溶浸膏，經(jīng)柱反相硅膠層析分離后結(jié)晶，檢測(cè)大麻二酚的回收率為99.54％，純度為93.24％。

實(shí)施例2

根據(jù)圖1-3對(duì)本實(shí)施例進(jìn)行說明，本發(fā)明提出的脫羧原位萃取富集漢麻葉片中的大麻二酚的方法具體步驟如下：

(1)取50.00g粉碎后漢麻葉片，以料液比1:10g/mL加入85％乙醇中，浸泡攪拌24h所得大麻二酚醇提液，所得提取液經(jīng)高效液相色譜檢測(cè)測(cè)得大麻二酚含量為34.45mg/g；

(2)減壓回收醇提液中部分乙醇后，加水至乙醇體積分?jǐn)?shù)為55％，再加入水相體積一半的二氯甲烷，105℃回流進(jìn)行脫羧原位萃取2.0h，冷卻后自然分層，大麻二酚富集于下層有機(jī)相中，此過程重復(fù)進(jìn)行兩次，合并有機(jī)相檢測(cè)CBD回收率為125％，減壓回收二氯甲烷得大麻二酚浸膏。

(3)95％的乙醇復(fù)溶浸膏，經(jīng)柱反相硅膠層析分離后結(jié)晶，檢測(cè)大麻二酚的回收率為101.33％，純度為94.54％。

實(shí)施例3

根據(jù)圖1-3對(duì)本實(shí)施例進(jìn)行說明，本發(fā)明提出的脫羧原位萃取富集漢麻葉片中的大麻二酚的方法具體步驟如下：

(1)取100.00g粉碎后漢麻葉片，以料液比1:10g/mL加入90％乙醇中，浸泡攪拌12h所得大麻二酚醇提液，所得提取液經(jīng)高效液相色譜檢測(cè)測(cè)得大麻二酚含量為33.29mg/g；

(2)減壓回收醇提液中部分乙醇后，加水至乙醇體積分?jǐn)?shù)為60％，再加入水相體積一半的二氯甲烷，105℃回流進(jìn)行脫羧原位萃取2.0h，冷卻后自然分層，大麻二酚富集于下層有機(jī)相中，此過程重復(fù)進(jìn)行兩次，合并有機(jī)相檢測(cè)CBD回收率為128％，減壓回收二氯甲烷得大麻二酚浸膏。

(3)95％的乙醇復(fù)溶浸膏，經(jīng)柱反相硅膠層析分離后結(jié)晶，檢測(cè)大麻二酚的回收率為102.76％，純度為95.03％。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。

 

摘自國家發(fā)明專利，發(fā)明人：梁德權(quán)，潘高峰，梁冰，劉傳海，楊新宇，李黨國，杜顯生，李賢勇；申請(qǐng)?zhí)枺?/font>202311754072.0；申請(qǐng)日：2023.12.20