摘  要：工業(yè)大麻是一種傳統(tǒng)經(jīng)濟作物，大麻二酚(Cannabidiol, CBD)是工業(yè)大麻中特有的萜烯酚類化合物,具有鎮(zhèn)痛?抗炎?抗抑郁?調(diào)節(jié)免疫?抗腫瘤等豐富的藥理活性,醫(yī)療潛力強大?國際市場上CBD供不應(yīng)求,CBD產(chǎn)量的提升備受國際關(guān)注?文章主要從影響CBD含量的遺傳調(diào)控機制?外界環(huán)境因素等角度出發(fā),對近5年CBD研究進(jìn)展進(jìn)行歸納?梳理和闡述,以期為CBD增產(chǎn)的深入研究提供參考依據(jù),同時為藥用大麻產(chǎn)業(yè)的發(fā)展提供新思路?

關(guān)鍵詞：藥用大麻；大麻二酚；遺傳因素；環(huán)境因素

工業(yè)大麻是一種古老的作物,在我國種植歷史悠久,據(jù)考證在南北朝時期已有種植,主要用于紡織?造紙?榨油等^[1]?隨著現(xiàn)代科技發(fā)展,工業(yè)大麻產(chǎn)業(yè)規(guī)模越發(fā)興茂,上等的纖維麻制品可遠(yuǎn)銷國外,優(yōu)質(zhì)的麻籽食品?食用油備受廣大消費者青睞,雌花提取出的多種大麻素應(yīng)用更加廣泛,掀起新一輪的生物材料革命?

大麻素是工業(yè)大麻植株中特有的一類萜烯酚類化合物,可分為酚類物質(zhì)和非酚類物質(zhì),其中酚類物質(zhì)以大麻二酚(cannabidiol, CBD)?四氫大麻酚(Δ⁹-Tetrahydrocannabinol, THC)為主,大麻萜酚(cannabigerol, CBG)?大麻環(huán)萜酚(cannahichromene, CBC)的含量稍遜色,余下的100多種萜烯酚類物質(zhì)含量較少^[2],藥用價值有待進(jìn)一步開發(fā)?

在國際上,大麻通常分為毒品大麻和工業(yè)大麻,在我國根據(jù)THC和CBD含量,可進(jìn)一步將其分為毒品大麻(THC含量高于0.3%)?工業(yè)大麻(THC含量低于0.3%,CBD含量低)?藥用大麻(THC含量低于0.3%,CBD含量高)^[3]?目前,藥用大麻主要培育方向仍是高CBD含量大麻^[4]?CBD的作用廣泛,已證明其具有消炎鎮(zhèn)痛?抗抑郁焦慮?治療癌癥等作用,近期研究^[5-8]顯示,CBD在皮膚病變治療?創(chuàng)傷應(yīng)激障礙治療?抗COVID-19及其他呼吸系統(tǒng)疾病等方面也具有一定療效,是一種多功能?療效強?潛力深的醫(yī)學(xué)原料?

國外對藥用大麻的研究處于領(lǐng)先地位,受限于法規(guī)政策,國內(nèi)藥用大麻的發(fā)展起步較晚,但在一些領(lǐng)域的研究已趕超國外^[9-11]?針對國際市場CBD供不應(yīng)求的現(xiàn)狀,諸多科研團隊為緩解供需壓力,在植株生長處理?田間管理改良?次生代謝通路及相關(guān)基因等方面均探究出CBD增產(chǎn)方法或主要影響因素的成果?本文針對影響CBD產(chǎn)量的遺傳因素?外界環(huán)境因素進(jìn)行系統(tǒng)性闡述,旨在為藥用大麻產(chǎn)業(yè)的發(fā)展提供新思路。

1 環(huán)境因素

在作物生長發(fā)育的進(jìn)程中，除了受到內(nèi)源遺傳調(diào)控外，還易受到外界環(huán)境因素的影響，使得同一地塊產(chǎn)出的生物量出現(xiàn)波動^[12]。在工業(yè)大麻中，大麻素的產(chǎn)生與積累極易受到外界因素的影響。

1.1 光照模式

工業(yè)大麻屬于喜光?短日照植物,收獲大麻素的主要工藝器官是雌花,雌花頂葉中大麻素含量最高,光照對于花期的影響較大,也是能夠影響大麻素積累的主要環(huán)境因素之一?

在Eichhorn等^[13]的研究中指出,美國將室內(nèi)培育工業(yè)大麻列為能源密集型產(chǎn)業(yè)之一,室內(nèi)PPFD(光合光子通量密度)達(dá)到1500μmol/m²/s時,可獲得穩(wěn)定?高產(chǎn)?高質(zhì)量的大麻素?研究^[14]表明,為植株提供特定波譜的光照,能夠改變植株的形態(tài),如:葉面積?葉片數(shù)量?花芽大小等?Mahlberg等^[15]研究發(fā)現(xiàn),使用約450μmol/m²/s的綠光照射工業(yè)大麻植株情況下,THC的含量呈現(xiàn)下降趨勢;Magagnini等^[16]證明在約450μmol/m²/s的藍(lán)光(12h光照?12h黑暗)下種植的工業(yè)大麻,大麻素含量得到有效提升,類似地UV-A能夠與藍(lán)光協(xié)同促進(jìn)大麻酚類物質(zhì)的積累?在光照時間的研究中,張靜等^[17]發(fā)現(xiàn)光照強度為460μmol/m²/s情況下,12h光照的工業(yè)大麻植株CBD含量與8?10h光照處理的呈顯著性差異?上述研究表明,在室內(nèi)或田間種植工業(yè)大麻時,合理選擇光周期時間?光譜波長可提高CBD的最終產(chǎn)出?

1.2 土肥管理

工業(yè)大麻是一種具有抗旱能力的作物,適宜種植在透水性好?富砂土的坡崗地,黑龍江省種植藥用大麻有一定歷史,對田間土肥管理摸索出部分技術(shù)要點?

藥用大麻溫室種植的肥料管理尤為重要,為了保證秧苗的快速營養(yǎng)生長,至少需要施加能夠提供90kg/hm²氮?60kg/hm²鉀?40kg/hm²磷酸鹽的肥料,同時增添其他特殊肥料有效提升CBD產(chǎn)量^[18]?如可每周噴施稀釋800倍的鮮牛奶以增加植株含鈣量?乳酸菌含量和蛋白酶活性;澆水時可按照75kg/hm²添加魚蛋白營養(yǎng)液,豐富植株有機質(zhì);在開花后葉面噴施600～1000倍甲殼素營養(yǎng)液,在花葉表面形成角質(zhì)保護層降低CBD揮發(fā)損耗;收獲花葉前15d,追加高質(zhì)量鉀肥,進(jìn)一步促進(jìn)CBD積累,同時避免次級代謝底物合成為THC?適宜的田間管理技術(shù),是保障CBD增產(chǎn)?穩(wěn)產(chǎn)的有效手段?

1.3 生物脅迫

大麻素具有一定的抗蟲性,使得工業(yè)大麻具有較好的抗蟲能力?在McPartland^[21]的統(tǒng)計中,約300種害蟲能夠?qū)I(yè)大麻植株造成損害,其中只有少數(shù)幾種對植株的破壞力較強,可能造成經(jīng)濟效益的流失,如歐洲玉米螟蟲(Ostrinia nubilalis)?大麻螟蟲(Grapholita delineana)?Park等^[22]的研究中,意外地發(fā)現(xiàn)煙草角蟲(Manduca sexta)使得工業(yè)大麻植株中CBGA?CBG?CBD的含量明顯降低,與預(yù)期的結(jié)果不同,推斷煙草角蟲的反流物抑制了植物的防御系統(tǒng)?在其他研究中^[23],昆蟲造成生物脅迫,是非常有效的大麻素含量提升刺激劑?不同的昆蟲對CBD產(chǎn)量影響模式不同,適宜昆蟲刺激產(chǎn)生的生物脅迫能否應(yīng)用為增產(chǎn)技術(shù),有待進(jìn)一步挖掘?

1.4 物理刺激

在生產(chǎn)中,除了通過土肥調(diào)整措施提高產(chǎn)量外,還可采用一些物理刺激提升大麻素的含量^[19]?物理刺激的方法通常包括遮光處理?收獲前降溫或冷水澆灌?人工機械損傷等,通過刺激觸發(fā)工業(yè)大麻植株的應(yīng)激系統(tǒng),促進(jìn)次生代謝產(chǎn)物的產(chǎn)生,最終達(dá)到使CBD增產(chǎn)的目的?在程超華^[20]的研究中,對工業(yè)大麻花期雌性植株材料的莖稈施加機械穿刺,在損傷后的2d內(nèi)CBD和THC含量顯著提升,JA?SA?ABA等激素水平也隨之改變?鑒于成本偏高?操作復(fù)雜等方面原因,通過物理刺激提升CBD產(chǎn)量的研究相對較少?

1.5 外源刺激

自發(fā)現(xiàn)植物激素以來,通過噴施外源激素來增產(chǎn)的方式已廣泛應(yīng)用于多種作物中^[24],外源激素對大麻素的產(chǎn)生與積累的影響少有研究^[25]?Apicella等^[26]的研究證實,噴施茉莉酸甲酯(Me-JA)能夠提升大麻素含量,在之前研究中JA被認(rèn)為可能參與調(diào)控腺毛發(fā)育和次生代謝合成?吳姍^[27]對于激素影響大麻素含量的研究比較深入,使用多種外源激素處理工業(yè)大麻材料,并測定大麻素含量以探尋合適的增產(chǎn)激素,其證實:200mg/L的ETH噴施工業(yè)大麻花葉能顯著提升CBD產(chǎn)量,同時THC的含量也有所提升;噴施赤霉素(GA3)后,短期內(nèi)能夠提升CBD含量,隨時間延長大麻素含量顯著降低;20mg/L的激動素(KT)噴施花葉后,CBD可提高69.08%,增產(chǎn)一半以上,但THC的含量有所提升?外源激素雖能達(dá)到增產(chǎn)目的,但THC與CBD含量通常同步增加,多種外源激素聯(lián)合噴施可能會產(chǎn)生抑制THC產(chǎn)量?提高CBD產(chǎn)出的效果,在工業(yè)大麻中該項研究尚為匱乏,在其他作物中有所試驗^[28]?

2 遺傳因素

自1995年鑒定得到四氫大麻酸合成酶(THCA)以來^[29],大麻素合成途徑備受關(guān)注,THC?CBD?CBG等主要大麻素的代謝途徑目前已基本明了,關(guān)鍵的合成酶OAC?PT?AAE等已有所研究?隨著科技進(jìn)步,更多的合成酶基因?轉(zhuǎn)錄因子?激素信號分子?結(jié)構(gòu)基因等為學(xué)者們發(fā)現(xiàn)和解析^[30],進(jìn)一步了解THC?CBD等大麻素的調(diào)控機理指日可待?

2.1 腺毛發(fā)育

腺毛是植物外部防御的重要屏障之一,可分為分泌型和非分泌型,分泌型腺毛是工業(yè)大麻花葉中產(chǎn)生和存儲大麻素的主要器官^[31],分泌型腺毛根據(jù)形態(tài)特征可進(jìn)一步分為頭狀有柄腺毛?頭狀無柄腺毛?球狀腺毛^[32],其中有柄腺毛能夠產(chǎn)生的大麻素種類最多,且分泌能力最強^[33]?目前工業(yè)大麻中腺毛發(fā)育的調(diào)控機制尚不清楚,但在其他植物中已有研究證實,R2R3-MYB和HD-ZIPIV(plant-specific homeodomain zipper family IV)轉(zhuǎn)錄因子家族參與到無柄腺毛發(fā)育為有柄腺毛的進(jìn)程^[34]?在Haiden等^[35]的研究中,發(fā)現(xiàn)在本氏煙中過表達(dá)R2R3-MYB轉(zhuǎn)錄因子家族的CsMIXTA,能夠增大腺毛的體型和密度,并促進(jìn)分支的產(chǎn)生,工業(yè)大麻中過表達(dá)CsMIXTA可能會提升大麻素的產(chǎn)量?在Ma等^[36]對工業(yè)大麻HD-ZIPIV轉(zhuǎn)錄因子的全基因組鑒定和表達(dá)分析中,鑒定到9個HD-ZIPIV轉(zhuǎn)錄因子,與擬南芥?水稻的HD-ZIPIV基因家族有共同的祖先,該基因家族中有4個主要在花中表達(dá),可能參與到腺毛形態(tài)發(fā)育與次生代謝產(chǎn)物的調(diào)控?

在工業(yè)大麻的其他組織器官內(nèi)大麻素的含量很低,因大麻素具有細(xì)胞毒性,會對正常的植物細(xì)胞產(chǎn)生一定的毒害,而腺毛細(xì)胞的抵御機制能夠削弱毒性,使得大麻素主要存在于雌花中,同時細(xì)胞毒性也是工程菌生產(chǎn)大麻素難的主要原因之一?Wang等^[37]對工業(yè)大麻轉(zhuǎn)運蛋白MATE(Multidrug and toxic compound extrusion proteins)家族進(jìn)行了鑒定與分析,發(fā)現(xiàn)MATEs蛋白除了能夠轉(zhuǎn)運植物激素?各種離子外,還可以轉(zhuǎn)運大麻素到細(xì)胞內(nèi),避免其遭受不必要的修飾(如糖基化)和對細(xì)胞產(chǎn)生毒性;RT-PCR結(jié)果顯示,CsMATEs家族的CsMATE23?CsMATE28和CsMATE34主要在花中表達(dá),推測其可能參與到大麻素的轉(zhuǎn)運,UV-B可以提升大麻素的產(chǎn)量,在UV-B處理下CsMATE23?CsMATE34的表達(dá)量有所提升,二者呈正相關(guān),CsMATEs可能在大麻素的生物合成與分泌中發(fā)揮重要作用?多種轉(zhuǎn)錄因子與基因的研究,填補了腺毛發(fā)育分子機制的部分空白,為今后闡明腺毛發(fā)育和大麻素增產(chǎn)提供了新方向?

2.2 花發(fā)育

花的發(fā)育情況也是影響大麻素產(chǎn)生與積累的主要因素,其他植物中調(diào)控花發(fā)育的基因在工業(yè)大麻中被認(rèn)為具有相似的作用?如Lu等^[38]的研究中:通過全基因組表達(dá)分析從工業(yè)大麻中共鑒定出51個bZIP基因家族成員,CsbZIP2?CsbZIP8?CsbZIP15和CsbZIP325等在花?苞片?莖和種子中均有表達(dá),尤其是CsbZIP2?CsbZIP8在花和苞片中呈高表達(dá);已證實水稻中bZIP56?bZIP64?bZIP79參與酚類和萜類化合物的合成^[39],CsbZIP25?CsbZIP32的結(jié)構(gòu)與之十分相似,親緣關(guān)系較近,推斷其可能參與大麻素的合成?

陳晗等^[40]對工業(yè)大麻PEBP基因家族分析中,共鑒定出12個PEBPs基因,主要參與到光形態(tài)建成?花的發(fā)育和調(diào)控等,該基因家族的啟動子中多包含光反應(yīng)順式調(diào)節(jié)元件?脫落酸反應(yīng)順式作用元件以及茉莉酸響應(yīng)元件等,其他參與花期的基因CsCOL?CsHd3a也有類似的元件^[41]?上述提到的CsMATE23等的啟動子中同樣包含豐富的光響應(yīng)順式作用元件,而在外源激素噴施的研究中,茉莉酸能夠提升大麻素的含量,推測PEBP基因家族等FT家族成員與大麻素的產(chǎn)生與積累存在一定聯(lián)系?

2.3 漢麻 AL 轉(zhuǎn)錄因子保守基序及基因結(jié)構(gòu)分析

大麻素及相關(guān)酶類主要在腺毛中合成和分泌,基本的代謝合成途徑已闡述明了^[42]?整個合成途徑以CBGA為中心前體,CBGA主要由兩個前體物質(zhì)OLA和GPP經(jīng)過異戊烯基轉(zhuǎn)移酶(PT)合成而來,其中OLA是2-甲基赤蘚糖醇磷酸(MEP)途徑合成的乙酰輔酶A在聚酮合酶(OLS)催化下產(chǎn)生,而GPP來自焦磷酸香葉酯(GPP)合成途徑;隨后CBGA作為前體物質(zhì),經(jīng)由不同的合成酶氧化環(huán)化成不同的大麻素,如大麻二酚酸合酶(CBDAS)催化產(chǎn)生CBDA,四氫大麻酸合酶(THCAS)催化產(chǎn)生THCA,這些大麻素還可進(jìn)一步變化為同系物或其他大麻素?

大麻素的代謝途徑較長,提升底物濃度能夠提高大麻素的最終產(chǎn)量,對DXR?DXS?HDR?HDS?MCT?MDS?OAC?PT等參與前體物質(zhì)合成的基因如何受到調(diào)控尚不明朗,目前多數(shù)研究主要針對大麻素合成酶展開?常麗等^[43]對CBDA1進(jìn)行生物學(xué)分析,發(fā)現(xiàn)該基因編碼544個氨基酸,其二級結(jié)構(gòu)豐富,包含較多蛋白質(zhì)修飾及活化位點,表明CBDA1在體內(nèi)受多種因子調(diào)控?潘根等^[44]對CBDAS基因家族進(jìn)行全基因組鑒定,共分析出5個成員,部分成員在雌蕊中表達(dá)量很高,該家族基因的啟動子中普遍存在較多光響應(yīng)元件,且激素響應(yīng)元件含量豐富,證實光照?激素是影響CBD產(chǎn)量的重要因素;在針對高CBD品種與低CBD品種的表達(dá)量鑒定中,高CBD品種CBDAS1的表達(dá)量顯著增加?姜穎等^[45]對CsTHCA進(jìn)行克隆,結(jié)果發(fā)現(xiàn):該基因共編碼545個氨基酸,證實基因的多態(tài)性是不同品種THC含量差異的主要原因,且CsTHCA的表達(dá)量與THC含量呈現(xiàn)正相關(guān);簡單的提高底物濃度或豐富CsCBDAS表達(dá)量僅能在一定限度內(nèi)提升CBD產(chǎn)量,中間或旁支代謝通路可能會截取前體物質(zhì),通過分子育種手段抑制CsTHCA的表達(dá)實現(xiàn)CBD產(chǎn)量提升是可行的?

3 結(jié)語與展望

藥用成分CBD的增產(chǎn)一直是藥用大麻領(lǐng)域的研究熱點,眾多學(xué)者在藥用大麻生長發(fā)育進(jìn)程中選取不同的切入點,從腺毛的發(fā)育到花的建成,從植株的營養(yǎng)生長時期到工藝成熟期,從土肥管理到物理刺激,針對CBD含量提升進(jìn)行深入的研究,為指導(dǎo)藥用大麻產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供了豐富的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)?

在許多研究^[46-47]中,影響CBD含量的因素間接或直接指向了光照和植物激素,對不同基因(如bZIP?PEBP?CBDAS等)進(jìn)行生物信息學(xué)分析,均在啟動子區(qū)域發(fā)現(xiàn)了光反應(yīng)元件或植物激素響應(yīng)元件,其他轉(zhuǎn)錄因子如C2H2?GRAS等也被證實參與到大麻素的合成,二者在響應(yīng)逆境脅迫中具有重要作用,與本文所述的物理刺激或脅迫能夠提升大麻素含量的研究不謀而合?因而,探究外界環(huán)境因素的影響,要與內(nèi)源遺傳因素相結(jié)合才能進(jìn)一步了解大麻素合成與積累的奧秘?

除本文敘述的產(chǎn)量提升方法外,一些學(xué)者對新方向進(jìn)行了嘗試,如CBD原材料提取方法的改良,Tiago等^[48]使用DESs取代常規(guī)的提取液,能夠有效保留CBD的生物活性,減少葉綠素和蠟質(zhì)等雜質(zhì)留存并大幅提高萃取率?生物工程菌生產(chǎn)大麻素因大麻素的生物毒性很難實現(xiàn),但在Luo等^[49]的努力下,酵母生產(chǎn)大麻素成為現(xiàn)實,通過給工程菌株喂食不同的脂肪酸輔以簡單的化學(xué)合成進(jìn)行補充,得到了大麻素類似物?自Mechoulam等^[50]確定CBD結(jié)構(gòu)以來,已有諸多學(xué)者通過化工手段實現(xiàn)了CBD的合成^[51],基因改造酵母合成大麻素是工業(yè)大麻合成生物學(xué)領(lǐng)域的創(chuàng)舉,有望構(gòu)建完整的大麻素體外合成產(chǎn)業(yè)鏈?

在其他作物中有“理想株型”的理念,在藥用大麻領(lǐng)域,也可以存在類似的期望,即通過多種生物學(xué)手段培育出高前體底物?高表達(dá)CBDAS?基因敲除或沉默THAS且能夠正常生長發(fā)育的藥用大麻品種,輔以合適的田間水肥?光照管理,并在收獲前進(jìn)行合適的物理刺激,最終獲得高產(chǎn)CBD?室內(nèi)培育藥用大麻技術(shù)還需要進(jìn)一步探索,可嘗試提高正常光照的光強和補充UV-A和藍(lán)光等光質(zhì)來促進(jìn)CBD的產(chǎn)生和積累?本文就影響CBD產(chǎn)生與積累的主要因素進(jìn)行總結(jié),進(jìn)一步拓寬CBD的研究方向,為藥用大麻產(chǎn)業(yè)提供合理導(dǎo)向?

 

參考文獻(xiàn)：

[1] 陳建華,臧鞏固,趙立寧,等.大麻化學(xué)成分研究進(jìn)展與開發(fā)我國大麻資源的探討[J].中國麻業(yè),2003(6):6-11.

[2] LI J,ZHU X W, WAN H H, etal. Progress on chemical constituents and analytical methods of cannabinoids in Cannabis sativa L[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2020,51(24):6414-6425.

[3] 李秋實,孟瑩,陳士林.藥用大麻種質(zhì)資源分類與研究策略[J].中國中藥雜志,2019,44(20):4309-4316.

[4] 白云俊,周新郢,袁媛,等.藥用大麻起源及其早期傳播[J].中草藥,2019,50(20):5071-5079.

[5] 許鵬程,程飚.大麻素在皮膚相關(guān)領(lǐng)域的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].中國美容醫(yī)學(xué),2022,31(3):172-176.

[6] 高菁華,吳可,彭曉晗,等.大麻素受體參與創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙記憶功能損害的研究進(jìn)展[J].生理科學(xué)展,2021,52(6):401-406.

[7] WANG B, Kovalchuk A, LI D, etal. Insearch of preventive strategies: novelhigh-CBD Cannabis sativa extracts modulate ACE2 expression in COVID-19 gateway tissues[J]. Aging,12(22):22425-22444.

[8] WANG B, LI D, Fiselier A, etal. New AKT-dependent mechanisms of anti-COVID-19 action of high-CBD Cannabis sativa extracts[J]. Cell Death Discovery,2022,8(1):110.

[9] 張利國.CsBLH7與CsKNAT4蛋白互作調(diào)節(jié)下胚軸細(xì)胞的伸長[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2022,50(6):41-44.

[10] 張效霏,張利國.工業(yè)大麻雄性不育研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技,2022(8):73-76.

[11] 張利國.纖維型工業(yè)大麻新品種龍大麻4號選育報告[J].中國麻業(yè)科學(xué),2023,45(3):102-105.

[12] 張利國,張效霏,王貴江,等.AtATH1轉(zhuǎn)錄活性研究及與AtOFP1蛋白互作的免疫共沉淀分析[J].分子植物育種,2021,19(20):6747-6749.

[13] Eichhorn B S, WU B S, Rufyikiri A S, etal. An update on plant photobiology and implications for cannabis production[J]. Frontiers in Plant Science,2019,10:296

[14] Bula R J, Morrow R C, Tibbitts T W, etal. Light-emitting diodes as a radiation source for plants[J].Hort Science,1991,26(2):203-205.

[15] Mahlberg P G, Hemphill J K. Effect of light quality on cannabinoid content of Cannabissativa L.(Cannabaceae)[J]. Botanical Gazette,1983,144(1):43-48.

[16] Magagnini G, Grassi G, Kotiranta S. The effect of light spectrum on the morphology and cannabinoid content of Cannabis sativa L.[J].Med Cannabis Cannabinoids,2018,1(1):19-27.

[17] 張靜,唐蜻,鄧燦輝,等.不同光照時長對生殖生長期工業(yè)大麻生長及大麻素含量的影響[J].華北農(nóng)學(xué)報,2022,37(增刊1):178-185.

[18] 劉峰.藥用工業(yè)大麻種植技術(shù)研究[J].黑龍江科學(xué),2022,13(16):28-30.

[19] 陳璇,郭孟璧,郭鴻彥,等.主要環(huán)境因子對大麻不同發(fā)育期四氫大麻酚積累的影響[J].西部林業(yè)科學(xué),2016,45(3):44-50.

[20] 程超華.應(yīng)用多組學(xué)方法研究工業(yè)大麻應(yīng)對機械損傷的響應(yīng)機制[D].武漢:華中農(nóng)業(yè)大學(xué),2021.

[21] McPartland J M. Epidemiology of the hemp borer, Grapholita delineana Walker (Lepidoptera:Oleuthreutidae), apest of Cannabis sativaL.[J]. IndHemp,2002,7(1):25-42.

[22] Park S H, Pauli C S, Gostin E L, etal. Effects of short-term environmental stresses on the onset of cannabinoid production in young immature flowers of industrial hemp(CannabissativaL.)[J].Cannabis Research,2022,4(1):1.

[23] Park S H, Staples S K, Gostin E L, etal. Contrastingroles of cannabidiol as an insecticide and rescuing agent for ethanol-induced death in the tobacco hornworm Manduca sexta[J]. Scientific Reports,2019,9(1):10481.

[24] 張燕.外源水楊酸和乙烯利誘導(dǎo)對釀酒葡萄白藜蘆醇合成及品質(zhì)的影響[D].銀川:寧夏大學(xué),2015.

[25] 吳姍,程超華,粟建光,等.外源激素浸種對大麻種子萌發(fā)?生殖生長及四氫大麻酚的影響[J].中國麻業(yè)科學(xué),2019,41(4):158-164.

[26] Apicella P V, Sands L B, Ma Y, etal. Delineating genetic regulation of cannabinoid biosynthesis during female flower development in Cannabis sativa[J]. Plant Direct,2022,6(6):e412.

[27] 吳姍.外源激素對大麻中大麻素含量的影響及轉(zhuǎn)錄組分析[D].北京:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院,2020.

[28] 章自高,徐翠蓮,周玲妹,等.復(fù)合激素和生長調(diào)節(jié)劑對小麥幼苗根系性狀及生理效應(yīng)的灰關(guān)聯(lián)分析[J].河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,1993,3:232-234.

[29] 姜穎,潘冬梅,李秋芝,等.大麻THCA合成酶基因的克隆及生物信息學(xué)分析[J].山西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2017,37(5):326-329.

[30] 張利國.CsKNAT3亞細(xì)胞定位與轉(zhuǎn)錄活性分析[J].分子植物育種,2023,21(11):3568-3571.

[31] 蔣征,王紅,吳啟南,等.藥用植物腺毛研究進(jìn)展[J].中草藥,2016,47(22):4118-4126.

[32] Livingston S J, Quilichini T D, Booth J K, etal. Cannabis glandular trichomes alter morphology and metabolite content during flower maturation [J]. Plant, 2020,101(1):37-56.

[33] Mahlberg P G, Kim E S. Accumulation of cannabinoids in glandular trichomes of Cannabis (Cannabaceae)[J]. Journal of Industrial Hemp,2004,9(1):15-36.

[34] Shi P, Fu X, Shen Q, etal. The roles of AaMIXTA1 in regulating the initiation of glandular trichomes and cuticle biosynthesis in Artemisia annua[J]. New Phytologist, 2018, 217(1):261-276.

[35] Haiden S R, Apicella P V, Ma Y, etal. Overexpression of CsMIXTA, a transcription factor from Cannabis sativa, increases glandular trichome density in tobacco leaves [J]. Plants, 2022,11(11):1519.

[36] Ma G, Zelman A K, Apicella P V, etal. Genome-wide identification and expression analysis of homeodomain leucine zipper subfamily IV(HD-ZIPIV) gene family in Cannabis sativaL. [J]. Plants, 2022,1(10):1307.

[37] WANG S, CAO X, MENG X, etal. Characterization and expression analysis of MATEs in Cannabis sativa L. reveals genes involving in cannabinoid synthesis[J]. Frontiers in Plant Science, 2022, 13: 1021088.

[38] LU M, MENG X X, ZHANG Y M, etal. Genome-wide identification and expression profiles of bZIP genes in Cannabis sativaL. [J]. Cannabis Cannabinoid Research, 2022, 7(6): 882-895.

[39] Miyamoto K, Nishizawa Y, Minami E, etal. Overexpression of the bZIP transcription factor OsbZIP79 suppresses the production of diterpenoid dphytoalexin in rice cells[J]. Plant Physiology, 2015, 173: 19-27.

[40] 陳晗,徐洪國,王志剛,等.大麻PEBP基因家族鑒定及生物信息學(xué)分析[J].福建農(nóng)業(yè)學(xué)報,2022,37(8):1016-1024.

[41] 李錚.大麻開花關(guān)鍵基因CsHd3a?CsCOL家族基因的克隆及表達(dá)譜分析[D].北京:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院,2021.

[42] Sirikantaramas S, Taura F, Tanaka Y, etal. Tetrahydrocannabinolic acid synthase, the enzyme controlling marijuana psychoactivity, is secreted into the storage cavity of the glandular trichomes[J]. Plant And Cell Physiology, 2005, 46(9): 1578-1582.

[43] 常麗,唐慧娟,李建軍,等.大麻CBDA1基因的生物信息學(xué)分析[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2017,45(29):144-148.

[44] 潘根,陶杰,聶榮,等.大麻CBDAS基因家族成員的全基因組鑒定及表達(dá)分析[J].華北農(nóng)學(xué)報,2021,36(增刊1):1-7.

[45] 姜穎,孫宇峰,李秋芝,等.大麻中THCA合成酶基因的表達(dá)分析[J].中國麻業(yè)科學(xué),2017,39(6):278-282.

[46] 劉美琦,孫偉,孟祥霄,等.藥用植物大麻C2H2基因家族鑒定與表達(dá)分析[J].藥學(xué)學(xué)報,2021,56(5):1486-1496.

[47] 張苗苗,于江珊,施江,等.大麻GRAS轉(zhuǎn)錄因子全基因組研究[J].中草藥,2021,52(5):1423-1433.

[48] Tiago F J, Paiva A,Matias A A, etal.Extraction of bioactive compounds from Cannabis sativa L. Flowersand/or leaves using deep eutectic solvents[J]. Frontiers in Nutrition, 2022, 9: 892314.

[49] Luo X, Reiter M A, Espaux L, etal. Complete biosynthesis of cannabinoids and their unnatural analogues in yeast [J]. Nature, 2019,567(7746):123-126.

[50] Mechoulam R,Parker L A,Gallily R.Cannabidiol: an overview of some pharmacological aspects [J]. Journal of Clinical Pharmacology. 2002, 42(Sup.1): 11S-19S.

[51] 周靜瑩,張偉.大麻二酚制備的研究進(jìn)展[J].中國民族民間醫(yī)藥,2022,31(2):72-79.

 

文章摘自：張元野,張利國,張明等.大麻二酚高產(chǎn)因素研究進(jìn)展[J].中國麻業(yè)科學(xué),2023,45(05):254-260.