摘  要：本發(fā)明涉及一種用于工業(yè)大麻中大麻酚類物質(zhì)檢測前處理的組合物，所述組合物包括多壁碳納米管(MWCNTs)、石墨化碳(GCBs)、C18硅膠填料、中性氧化鋁、N?丙基乙二胺固相吸附劑(PSA)或硅酸鎂中的一種或多種。本發(fā)明提供的組合物對(duì)工業(yè)大麻中的主要擾物質(zhì)葉綠素、葉黃素、脂類物質(zhì)有較好的吸附作用和去除效果，同時(shí)對(duì)于其他痕量物質(zhì)如大麻酚類物質(zhì)等的吸附較小，適合于工業(yè)大麻中痕量物質(zhì)的富集分析。

技術(shù)要點(diǎn)

1.一種用于工業(yè)大麻中大麻酚類物質(zhì)檢測前處理的組合物，其特征在于，所述組合物包括多壁碳納米管(MWCNTs)、石墨化碳(GCBs)、C18硅膠填料、中性氧化鋁、N-丙基乙二胺固相吸附劑(PSA)或硅酸鎂中的一種或多種。

2.如權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，所述多壁碳納米管包括氨基多壁碳納米管和/或羧基多壁碳納米管。

3.如權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，所述大麻酚類物質(zhì)包括四氫大麻酚酸(THCA)、大麻二酚酸(CBDA)、大麻酚(CBN)、大麻二酚(CBD)或△9-四氫大麻酚(THC)中的一種或多種。

4.如權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，所述前處理可以去除包括葉綠素、葉黃素或脂類物質(zhì)中的一種或多種。

5.如權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，所述多壁碳納米管(MWCNTs)、石墨化碳(GCBs)、C18硅膠填料、中性氧化鋁、N-丙基乙二胺固相吸附劑(PSA)和硅酸鎂的質(zhì)量比為1-10:1-10:1-10:10-100:5-50:2-20。

6.如權(quán)利要求5所述的組合物，其特征在于，所述壁碳納米管(MWCNTs)、石墨化碳(GCBs)、C18硅膠填料、中性氧化鋁、N-丙基乙二胺固相吸附劑(PSA)和硅酸鎂的質(zhì)量比為1-5:1-5:1-5:10-50:5-25:2-10。

7.使用權(quán)利要求1所述的組合物處理工業(yè)大麻的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)稱取適量工業(yè)大麻樣品，研碎，用有機(jī)溶劑浸泡；

2)取適量步驟1)的溶液加入離心管中，超聲震蕩并離心；

3)將步驟2)中離心后的上清液倒入裝有所述組合物的離心管中，并震蕩；

4)將經(jīng)過步驟3)處理后的離心管進(jìn)行離心，取上清液進(jìn)行檢測。

8.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，步驟2)中超聲震蕩約30min，然后以4000-8000r/min離心約5min。

9.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，步驟3)中震蕩時(shí)間約5min。

10.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，步驟4)中以4000-8000r/min離心約5min。

 

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分析化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種適用于工業(yè)大麻中大麻酚類物質(zhì)檢測前處理的組合物及使用方法。

 

背景技術(shù)

大麻中主要的功效成分為大麻酚類物質(zhì)，其中四氫大麻酚酸(THCA)、大麻二酚酸(CBDA)、大麻酚(CBN)、大麻二酚(CBD)、^△9-四氫大麻酚(THC)這5種含量較多，應(yīng)用最廣泛。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，大麻二酚(CBD)是目前應(yīng)用前景最廣泛的大麻提取物，是一種淡黃色樹脂或結(jié)晶，在醫(yī)學(xué)上對(duì)癲癇、癌癥，多發(fā)性硬化癥等多種疾病有明顯的治療效果。^△9-四氫大麻酚(THC)在吸食或口服后對(duì)中樞神經(jīng)的作用最強(qiáng)，且能與大麻酚(CBN)和大麻二酚(CBD)進(jìn)行相互轉(zhuǎn)化，因此需要嚴(yán)格控制。由于大麻中含有^△9-四氫大麻酚(THC)，曾一度受到世界范圍內(nèi)的嚴(yán)格管制。因此對(duì)四氫大麻酚酸(THCA)、大麻二酚酸(CBDA)、大麻酚(CBN)、大麻二酚(CBD)、^△9-四氫大麻酚(THC)這五種物質(zhì)的檢測有助于開發(fā)評(píng)估大麻的基礎(chǔ)性研究。

我國工業(yè)大麻中大麻酚類物質(zhì)含量最高僅為3％左右，而有些國家改良的工業(yè)大麻中大麻酚類物質(zhì)含量最高可達(dá)15％，因此我們目前現(xiàn)有的技術(shù)手段對(duì)于檢測這種含量較高的工業(yè)大麻酚類物質(zhì)尚有提升的空間。為了促進(jìn)工業(yè)大麻的醫(yī)學(xué)用途以及推動(dòng)工業(yè)大麻的良種繁育，有必要開發(fā)準(zhǔn)確、靈敏的檢測方法，以檢測工業(yè)大麻中大麻二酚(CBD)、大麻二酚酸(CBDA)、大麻酚(CBN)、△9-四氫大麻酚(THC)、四氫大麻酚酸(THCA)等五種大麻酚類物質(zhì)。

但是工業(yè)大麻中富含葉綠素、葉黃素、脂類物質(zhì)等干擾基質(zhì)，具有很強(qiáng)的基質(zhì)效應(yīng)，嚴(yán)重影響工業(yè)大麻中痕量物質(zhì)(如大麻酚類物質(zhì))的檢測。目前，工業(yè)大麻中葉綠素、葉黃素、脂類物質(zhì)的去除方法主要有固相萃取法、固相微萃取法、液液萃取法、加速溶劑萃取法等幾種方法。這些傳統(tǒng)的萃取方法在一定程度上能夠勝任樣品前處理的需求，但實(shí)際操作中還存在一些不足，例如前處理時(shí)葉綠素、葉黃素或脂類物質(zhì)去除不徹底，導(dǎo)致后續(xù)檢測結(jié)果不精確。此外，還存在操作繁瑣、操作費(fèi)時(shí)、樣品易污染、凈化效率低等問題。

有鑒于此，本發(fā)明旨在提供一種適用于工業(yè)大麻中大麻酚類物質(zhì)檢測前處理的組合物及使用方法，以解決上述問題中的至少一種。

 

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的之一在于提供一種用于工業(yè)大麻中大麻酚類物質(zhì)檢測前處理的組合物。

 

具體技術(shù)方案

一種用于工業(yè)大麻中大麻酚類物質(zhì)檢測前處理的組合物，所述組合物包括多壁碳納米管(MWCNTs)、石墨化碳(GCBs)、C18硅膠填料、中性氧化鋁、N-丙基乙二胺固相吸附劑(PSA)或硅酸鎂中的一種或多種。

進(jìn)一步，所述多壁碳納米管包括氨基多壁碳納米管和/或羧基多壁碳納米管。

PSA是弱陰離子交換凈化劑，可強(qiáng)烈的吸附提取液中帶有氫鍵的基質(zhì)共萃物，保留提取液中的酸性基團(tuán)，對(duì)多酚類物質(zhì)的去除能力較強(qiáng)，對(duì)茶多酚具有較好的去除效果。多壁碳納米管是一種由單層或多層石墨片層卷曲而成的空心柱狀碳納米材料，多壁碳納米管有較大的比表面積，因此吸附色素能力非常強(qiáng)。而同時(shí)使用氨基多壁碳納米管和羧基多壁碳納米管可同時(shí)兼顧樣品中酸性和堿性雜質(zhì)的吸附。

進(jìn)一步，所述大麻酚類物質(zhì)包括四氫大麻酚酸(THCA)、大麻二酚酸(CBDA)、大麻酚(CBN)、大麻二酚(CBD)或^△9-四氫大麻酚(THC)中的一種或多種。經(jīng)過本發(fā)明提供的組合物前處理的工業(yè)大麻樣品，在后續(xù)的檢測中，可以檢測出上述5種大麻酚類物質(zhì)中的一種、幾種或五種同時(shí)檢出。

進(jìn)一步，所述前處理可以去除包括葉綠素、葉黃素或脂類物質(zhì)中的一種或多種。

進(jìn)一步，所述多壁碳納米管(MWCNTs)、石墨化碳(GCBs)、C18硅膠填料、中性氧化鋁、N-丙基乙二胺固相吸附劑(PSA)和硅酸鎂的質(zhì)量比為1-10:1-10:1-10:10-100:5-50:2-20。

進(jìn)一步，所述多壁碳納米管(MWCNTs)、石墨化碳(GCBs)、C18硅膠填料、中性氧化鋁、N-丙基乙二胺固相吸附劑(PSA)和硅酸鎂的質(zhì)量比為1-5:1-5:1-5:10-50:5-25:2-10。

作為一種優(yōu)選，所述壁碳納米管(MWCNTs)、石墨化碳(GCBs)、C18硅膠填料、中性氧化鋁、N-丙基乙二胺固相吸附劑(PSA)和硅酸鎂的質(zhì)量比為1:1:1:10:5:2。

上述組合物的比例是本發(fā)明技術(shù)效果的最優(yōu)選，是實(shí)驗(yàn)結(jié)果的最優(yōu)數(shù)據(jù)。但本發(fā)明提供的幾種組合物比值的范圍依然是本發(fā)明要求保護(hù)的內(nèi)容，其技術(shù)效果依然可以解決本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題。

本發(fā)明的目的之二在于提供一種使用上述組合物處理工業(yè)大麻的方法，具體技術(shù)方案如下。

使用上述組合物處理工業(yè)大麻的方法，包括以下步驟：

1)     稱取適量工業(yè)大麻樣品，研碎，用有機(jī)溶劑浸泡；

2)     取步驟1)的溶液超聲震蕩并離心；

3)     將步驟2)中離心后的上清液倒入裝有所述組合物的離心管中，并震蕩；

4)     將經(jīng)過步驟3)處理后的離心管進(jìn)行離心，取上清液進(jìn)行檢測。

進(jìn)一步，步驟2)中超聲震蕩約30min，然后以4000-8000r/min離心約5min。進(jìn)一步，步驟3)中震蕩時(shí)間約5min。

進(jìn)一步，步驟4)中以4000-8000r/min離心約5min。

進(jìn)一步，所述離心管包括15mL和/或50mL兩種規(guī)格中的一種或多種。

在本發(fā)明其中一個(gè)實(shí)施例提供的方法中，將1份多壁碳納米管(MWCNTs)、1份石墨化碳(GCBs)、1份C18硅膠填料、10份中性氧化鋁、5份N-丙基乙二胺固相吸附劑(PSA)、2份硅酸鎂等幾種填料混合均勻，按比例裝入15mL或者50mL的離心管中。

 

有益效果

本發(fā)明提供了一種組合物，包括多壁碳納米管(MWCNTs)、石墨化碳(GCBs)、C18硅膠填料、中性氧化鋁、N-丙基乙二胺固相吸附劑(PSA)、硅酸鎂等幾種填料。對(duì)工業(yè)大麻中的主要干擾物質(zhì)葉綠素、葉黃素、脂類物質(zhì)有較好的吸附作用和去除效果，同時(shí)對(duì)于其他痕量物質(zhì)如大麻酚類物質(zhì)等的吸附較小，適合于工業(yè)大麻中痕量物質(zhì)的富集分析。

本發(fā)明還提供了一種使用上述組合物對(duì)工業(yè)大麻進(jìn)行前處理的方法，該方法操作簡便，效果顯著，可以極大提高工業(yè)大麻中痕量物質(zhì)前處理效率，降低工業(yè)大麻樣品中痕量物質(zhì)前處理操作的時(shí)間和成本。

 

附圖說明

為了更清楚地說明本發(fā)明實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對(duì)實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作一簡單地介紹。在所有附圖中，類似的元件或部分一般由類似的附圖標(biāo)記標(biāo)識(shí)。附圖中，各元件或部分并不一定按照實(shí)際的比例繪制。顯而易見地，下面描述中的附圖是本發(fā)明的一些實(shí)施例，對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)性的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其它的附圖。

圖1是本發(fā)明其中一個(gè)實(shí)施例中裝有組合物的凈化管的示意圖。

圖2是經(jīng)本發(fā)明其中一個(gè)實(shí)施例組合物前處理后的工業(yè)大麻HPLC-MS/MS圖譜。

 

具體實(shí)施方式

為使本發(fā)明實(shí)施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例中的附圖，對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。顯然，所描述的實(shí)施例是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。

需要說明的是，在本文中，術(shù)語“包括”、“包含”或者其任何其他變體意在涵蓋非排他性的包含，從而使得包括一系列要素的過程、方法、物品或者裝置不僅包括那些要素，而且還包括沒有明確列出的其他要素，或者是還包括為這種過程、方法、物品或者裝置所固有的要素。在沒有更多限制的情況下，由語句“包括一個(gè)……”限定的要素，并不排除在包括該要素的過程、方法、物品或者裝置中還存在另外的相同要素。

如在本說明書中使用的，術(shù)語“大約”(例如，用于電離射線輻照劑量率、輻射時(shí)間)，典型地表示為所述值的+/-5％，更典型的是所述值的+/-4％，更典型的是所述值的+/-3％，更典型的是所述值的+/-2％，甚至更典型的是所述值的+/-1％，甚至更典型的是所述值的+/-0.5％。

實(shí)施例一

制備15mL工業(yè)大麻中大麻酚類物質(zhì)提取基質(zhì)分散凈化管。

該基質(zhì)分散凈化管的結(jié)構(gòu)示意圖如圖1所示。所述基質(zhì)分散凈化管的制備方法為：取市售15mL離心管，取0.15g多壁碳納米管(MWCNTs)、0.15g石墨化碳(GCBs)、0.2gC18硅膠填料、1.7g中性氧化鋁、0.8gN-丙基乙二胺固相吸附劑(PSA)、0.4g硅酸鎂等幾種填料混合均勻，裝入市售15mL離心管中制的。

實(shí)施例二

制備50mL工業(yè)大麻中大麻酚類物質(zhì)提取基質(zhì)分散凈化管。

所述基質(zhì)分散凈化管的制備方法為：取市售50mL離心管，取0.5g多壁碳納米管(MWCNTs)、0.5g石墨化碳(GCBs)、0.5gC18硅膠填料、5g中性氧化鋁、2.5gN-丙基乙二胺固相吸附劑(PSA)、1g硅酸鎂等幾種填料混合均勻，裝入市售50mL離心管中制的。

實(shí)施例三

15mL工業(yè)大麻中大麻酚類物質(zhì)檢測前處理的方法。

將工業(yè)大麻研碎后，過60目篩，取1g樣品于離心管中，加入10mL甲醇，超聲震蕩30min，5000r/min離心5min，取上清液加入裝有凈化填料的15mL基質(zhì)分散凈化管，震蕩5min后，以5000r/min離心5min，取上清液上機(jī)檢測。樣品經(jīng)凈化后對(duì)葉綠素、葉黃素、脂肪類物質(zhì)的去除效果如下表1所示。樣品經(jīng)HPLC-MS/MS檢測后，所得回收率如下表2所示。

表1  15ml凈化管中工業(yè)大麻中葉綠素、葉黃素、脂肪類物質(zhì)的去除效果

 

表2  15mL工業(yè)大麻HPLC-MS/MS檢測結(jié)果

 

實(shí)施例四

50mL工業(yè)大麻中大麻酚類物質(zhì)檢測前處理的方法

將工業(yè)大麻研碎后，過60目篩，取3g樣品于離心管中，加入30mL甲醇，超聲震蕩30min，5000r/min離心5min，取上清液加入裝有凈化填料的50mL基質(zhì)分散凈化管，震蕩5min后，以5000r/min離心5min，取上清液上機(jī)檢測。

樣品經(jīng)凈化后對(duì)葉綠素、葉黃素、脂肪類物質(zhì)的去除效果如下表3所示。樣品經(jīng)HPLC-MS/MS檢測后，所得回收率如下表4所示：

表3  50ml凈化管中工業(yè)大麻中葉綠素、葉黃素、脂肪類物質(zhì)的去除效果

 

表4  50mL工業(yè)大麻HPLC-MS/MS檢測結(jié)果

 

實(shí)施例五

50mL工業(yè)大麻中大麻酚類物質(zhì)檢測前處理的方法

將工業(yè)大麻研碎后，過60目篩，取3g樣品于離心管中，加入30mL甲醇，超聲震蕩30min，5000r/min離心5min，取上清液加入裝有凈化填料的50mL商品化HLB凈化管，震蕩5min后，以5000r/min離心5min，取上清液上機(jī)檢測。樣品經(jīng)凈化后對(duì)葉綠素、葉黃素、脂肪類物質(zhì)的去除效果如下表5所示。

表5  50ml商品化HLB凈化管中工業(yè)大麻中葉綠素、葉黃素、脂肪類物質(zhì)的去除效果

 

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：樣品經(jīng)商品化HLB凈化管后對(duì)葉綠素、葉黃素、脂肪酸的去除效果并不好。

上面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的實(shí)施例進(jìn)行了描述，但是本發(fā)明并不局限于上述的具體實(shí)施方式，上述的具體實(shí)施方式僅僅是示意性的，而不是限制性的，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員在本發(fā)明的啟示下，在不脫離本發(fā)明宗旨和權(quán)利要求所保護(hù)的范圍情況下，還可做出很多形式，這些均屬于本發(fā)明的保護(hù)之內(nèi)。

 

摘自國家發(fā)明專利，發(fā)明人：蘭韜，席興軍，初僑，申請(qǐng)?zhí)?/span>202011208104.3，申請(qǐng)日2020.11 .03