摘要：為提高羅布麻生物脫膠效率，構(gòu)建枯草芽孢桿菌與黃孢原毛平革菌的復(fù)合脫膠菌群，利用超臨界CO2預(yù)處理破除羅布麻韌皮纖維的天然生物抗性屏障。結(jié)果表明：未經(jīng)預(yù)處理的羅布麻在復(fù)合菌群脫膠后殘膠率為19.6%，相較于單一菌種效果提升了26.9%；經(jīng)超臨界CO2預(yù)處理后脫膠，殘膠率僅為10.8%。
關(guān)鍵詞：羅布麻；生物脫膠；生物抗性屏障；超臨界CO2；復(fù)合菌群
羅布麻屬夾竹桃科多年生草本宿根植物［1］，具有悠久的藥用歷史［2］。羅布麻被證實有良好的抗菌性［3－5］，是一種極具潛力的天然功能性纖維原料。韌皮纖維制備中，微生物脫膠具有清潔性、可持續(xù)性的優(yōu)勢，但目前生物脫膠效率仍有待提高。就羅布麻生物脫膠而言，韌皮組織中由果膠、木質(zhì)素和半纖維素等非纖維素物質(zhì)構(gòu)成的異質(zhì)高聚物復(fù)合體和黃酮等天然抑菌物質(zhì)，一起構(gòu)成了羅布麻生物抗性屏障［6－8］，這增加了脫膠過程的生物催化反應(yīng)難度［9］。如何通過預(yù)處理破解生物抗性屏障，提高麻纖維生物的脫膠效率尤為重要。本研究針對羅布麻韌皮中非纖成分構(gòu)建高效脫膠菌群，通過預(yù)處理破除韌皮的生物抗性屏障，從而提高生物脫膠效率。
1試驗部分
1.1試驗材料與儀器
羅布麻：新疆戈寶紅麻有限公司。
菌種：枯草芽孢桿菌（天津工業(yè)大學(xué)清潔染整課題組Q）、黃孢原毛平革菌（廣東省微生物菌種保藏中心GIM3.383）。
種子培養(yǎng)基：葡萄糖20.0g/L、蛋白胨10.0g/L、磷酸二氫鉀3.0g/L、氯化鈉2.0g/L、維生素B1微量。
發(fā)酵培養(yǎng)基：葡萄糖20.0g/L、磷酸二氫鉀3.0g/L、硫酸鎂1.5g/L、維生素B1微量。
試劑：葡萄糖（天津市光復(fù)科技發(fā)展有限公司），蛋白胨（北京普博欣生物試劑公司），硫酸鎂（天津大學(xué)科威公司），磷酸二氫鉀（天津市化學(xué)試劑六廠），無水乙醇（天津市江天化工有限公司），維生素B1、3，5－二硝基水楊酸（天津光復(fù)精細(xì)化工有限公司），酒石酸鉀鈉、苯酚、氫氧化鈉（天津科密歐化學(xué)試劑有限公司）。
儀器：電子分析天平（天津天馬衡基儀器有限公司），電熱鼓風(fēng)干燥箱（天津市中環(huán)實驗電爐有限公司），單人單面凈化工作臺（蘇州凈化設(shè)備有限公司），生化培養(yǎng)箱（上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司），立式壓力蒸汽滅菌器（上海申安醫(yī)療器械廠），紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司），臺式掃描電鏡，傅立葉變換量紅外光譜儀（美國賽默飛世爾科技），全自動物理化學(xué)吸附儀（美國康塔公司），X射線衍射儀（德國BRUKER公司）。
1.2試驗方法
1.2.1超臨界CO2預(yù)處理
將羅布麻韌皮纖維在50℃中烘至干燥，干燥后的羅布麻韌皮纖維剪成5cm長短的樣品，用醫(yī)用紗布包裹放入超臨界發(fā)生裝置（如圖1所示）的反應(yīng)釜中，無水乙醇為夾帶劑。處理溫度45℃，壓力20MPa，總流量30.0g/L，夾帶劑含2％，處理60min。
1． CO2氣瓶；2.凈化器；3.制冷機；4.高壓泵；5.夾帶劑儲罐；6.混合器；7.熱交換器；8.反應(yīng)釜；9.變壓裝置；10.分離釜
圖1 超臨界CO2預(yù)處理裝置示意圖
1.2.2生物量測試
枯草芽孢桿菌為細(xì)菌，生物量測試選用600nm波長進(jìn)行光電比濁測定，用未接種的液體培養(yǎng)基作空白對照。枯草芽孢桿菌按5％的接種量接種到培養(yǎng)基中，每隔4h取樣測定，測定前將培養(yǎng)液充分振蕩，使微生物分布均勻。以光密度值為縱坐標(biāo)，培養(yǎng)時間為橫坐標(biāo)繪制枯草芽孢桿菌的生長曲線。
黃孢原毛平革菌是真菌，生物量測試采用菌絲干燥質(zhì)量法，以菌體干燥質(zhì)量為縱坐標(biāo)，培養(yǎng)時間為橫坐標(biāo)，繪制黃孢原毛平革菌生長曲線。
1.2.3酶活測試
果膠酶酶活測試采用DNS法，漆酶活性的測定采用ABTS法［10］。
1.2.4脫膠效果表征
用質(zhì)量損失率表征脫膠效果，計算方法見式（1）。
式中：w為質(zhì)量損失率，％；w0為脫膠前樣品質(zhì)量，g；w1為脫膠后樣品質(zhì)量，g。按照GB5889—86《苧麻化學(xué)成分定量分析方法》對羅布麻纖維進(jìn)行殘膠率測定，計算方法見式（2）。
式中：ω為殘膠率，％；m0為試驗前羅布麻韌皮纖維質(zhì)量，g；m1為試驗后韌皮纖維質(zhì)量；g。
2結(jié)果與討論
2.1羅布麻韌皮的超臨界CO2處理
高比例非纖維素物質(zhì)、致密多層網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)和黃酮等抑菌物質(zhì)成分構(gòu)成了羅布麻韌皮纖維生物抗性屏障［4，9］。為提高生物可及性，用超臨界二氧化碳對羅布麻纖維進(jìn)行預(yù)處理研究。
2.1.1形態(tài)結(jié)構(gòu)
觀察預(yù)處理前后羅布麻韌皮纖維形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化，結(jié)果如圖2所示。
（a）羅布麻原麻
（b）超臨界CO2處理后的纖維
圖2 預(yù)處理前后羅布麻韌皮纖維電鏡圖（×500）
由圖2可知，羅布麻韌皮纖維是束纖維，其中單纖維被膠質(zhì)層緊密包裹。束纖維外的膠質(zhì)層在脫膠過程阻礙微生物及酶與底物接觸，是生物脫膠的第一層屏障。預(yù)處理后，纖維結(jié)構(gòu)松散開來，單纖維間的距離增大，且包裹在纖維上的膠減少。這說明預(yù)處理不僅可以改變羅布麻韌皮纖維的形態(tài)結(jié)構(gòu)，同時還能去除部分膠質(zhì)，破壞纖維內(nèi)致密的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，提高生物催化劑的可及性。
羅布麻韌皮組織內(nèi)部的孔隙結(jié)構(gòu)對酶與底物的接觸有重要影響。為考察預(yù)處理前后羅布麻韌皮組織內(nèi)部孔隙結(jié)構(gòu)的變化，利用全自動物理化學(xué)吸附儀，對樣品的比表面積、孔容和孔徑進(jìn)行測試，結(jié)果如圖3所示。
圖3 預(yù)處理前后羅布麻韌皮纖維孔徑分布圖
孔徑分布代表著韌皮纖維內(nèi)部微細(xì)孔的容積隨孔徑尺寸的變化情況，是表征物質(zhì)孔隙結(jié)構(gòu)的重要參數(shù)之一。由圖3中的數(shù)據(jù)可以看出，羅布麻韌皮纖維處理前后孔徑在1.000～40.000nm之間，在3.000～15.000nm分布最廣。預(yù)處理后，3.000~15.000nm孔徑明顯增加，而且累計孔體積增加顯著。這說明超臨界CO2處理能有效地改善羅布麻纖維內(nèi)部孔隙結(jié)構(gòu)，提高韌皮纖維內(nèi)部的孔徑和孔容。
計算羅布麻韌皮纖維處理前后比表面積和體積，結(jié)果見表1。
表1 預(yù)處理前后羅布麻韌皮纖維孔隙結(jié)構(gòu)
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項目 |
孔徑/ nm |
比表面積/ （m2·g－1） |
體積/ （mL·g－1） |
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原麻 |
3.433 |
6.545 |
0.006 |
|
超臨界CO2 |
3.806 |
6.036 |
0.010 |
由表1可知，超臨界預(yù)處理后羅布麻韌皮纖維比表面積小幅度減小，孔徑和體積顯著增大。這為生物大分子進(jìn)入纖維內(nèi)提供了更多空間，有利于生物脫膠的進(jìn)行。
2.1.2超分子結(jié)構(gòu)
為進(jìn)一步研究預(yù)處理對羅布麻韌皮纖維結(jié)構(gòu)的影響，測試了預(yù)處理前后樣品的超分子結(jié)構(gòu)，結(jié)果如圖4所示。
圖4 預(yù)處理前后羅布麻韌皮纖維XRD圖譜
由圖4可知，超臨界CO2預(yù)處理后的羅布麻韌皮纖維XRD衍射圖譜在2θ=5.0°~13.0°出現(xiàn)明顯的變化，101晶面（2θ=15.0°）、200晶面（2θ=22.0°）和040晶面（2θ=34.5°）說明了羅布麻韌皮纖維在預(yù)處理前后都屬于典型纖維素Ⅰ晶型［11］。由預(yù)處理后101晶面、200晶面和040晶面的衍射峰，可以看出處理后麻的晶態(tài)結(jié)構(gòu)有明顯變化
計算處理前后羅布麻韌皮纖維的晶面間距和晶粒尺寸，見表2。
|
項目 |
結(jié)晶 度/％ |
晶面間 距/nm |
晶粒尺 寸/nm |
|
原麻 |
74 |
4.73 |
2.22 |
|
超臨界CO2 |
52 |
6.65 |
2.12 |
表2 預(yù)處理前后羅布麻韌皮纖維結(jié)晶參數(shù)
該結(jié)果表明，超臨界CO2處理后結(jié)晶度下降幅度大，達(dá)到了22％，晶面間距明顯增加。在超臨界CO2處理中，CO2滲透進(jìn)羅布麻韌皮纖維中，使其發(fā)生溶脹，分子間的距離增大，分子間的相互作用減小［12］，可降低纖維素Ⅰ晶型結(jié)晶時的能壘，破壞結(jié)晶區(qū)的纖維素，改變各項結(jié)晶參數(shù)［13］。結(jié)晶度高的纖維溶脹比較困難［14］，結(jié)晶度下降，無定形的纖維素分子間和分子內(nèi)的氫鍵作用力減弱，分子鏈上的羥基大部分暴露出來，增強了纖維素和木質(zhì)素的可及度和反應(yīng)活性，也增強了脫膠過程中水的溶脹作用；韌皮纖維的晶面結(jié)構(gòu)被破壞，有利于微生物和酶滲透進(jìn)入纖維內(nèi)部與木質(zhì)素反應(yīng)，提高脫膠效率。
2.1.3分子結(jié)構(gòu)
研究預(yù)處理對羅布麻韌皮纖維結(jié)構(gòu)組成的影響，用傅立葉變換紅外光譜儀對預(yù)處理前后的樣品進(jìn)行測試，結(jié)果如圖5所示。
圖5 預(yù)處理前后羅布麻韌皮纖維紅外光譜圖
圖5顯示了羅布麻韌皮纖維超臨界CO2處理前后的分子結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果表明，處理前后的樣品在3420cm－1、1432cm－1、1164cm－1和1058cm－1處均有吸收峰，3420cm－1的吸收峰屬于羥基O—H伸縮振動，主要代表纖維素，而1432cm－1、1164cm－1和1058cm－1則是纖維素結(jié)構(gòu)在指紋區(qū)的吸收峰。
3337cm－1和3283cm－1處是O—H伸縮振動，超臨界CO2處理后，此處吸收峰峰強減弱，說明處理過程伴隨著纖維素的損失。
2920cm－1、2848cm－1處的吸收峰是蠟質(zhì)的飽和烷烴C—H的拉伸振動［15］。處理后2850cm－1處的吸收峰消失，表明過程中蠟質(zhì)被去除。蠟質(zhì)層有很強的疏水性，處理過程中，超臨界CO2流體由于分子較小可以滲透進(jìn)入羅布麻韌皮纖維內(nèi)部，從而破壞其生物抗性屏障，相當(dāng)一部分的膠質(zhì)在此過程中可以被破碎帶出，增強了后續(xù)試驗過程中水的溶脹作用。
1737cm－1處的振動峰，是果膠中的甲酯和羧酸或半纖維素中的乙?；?/font>C=O伸縮引起的，經(jīng)過超臨界CO2處理的樣品光譜在此處的吸收峰接近消失，說明超臨界CO2處理對果膠和半纖維素的去除效果優(yōu)異。
1599cm－1為C=O和C=C伸縮振動的疊加，為韌皮中黃酮提取物的特征峰。超臨界CO2處理后，此處吸收峰有了顯著減弱，說明超臨界CO2能萃取出韌皮中的黃酮物質(zhì)，削弱其抑菌性，有利于微生物滲透生長。
1428cm－1和1463cm－1是芳香族骨架振動和C—H的拉伸振動，與羅布麻韌皮纖維中的木質(zhì)素有關(guān)。超臨界CO2處理后此處的吸收峰都有大幅度降低，表明超臨界CO2能夠有效地去除韌皮中的木質(zhì)素。
羅布麻韌皮纖維在超臨界CO2處理過程中，膠質(zhì)成分的去除，減輕了后續(xù)生物脫膠的負(fù)擔(dān)。同時，由于大量非纖成分的去除，使得羅布麻韌皮組織結(jié)構(gòu)變得疏松，增大了生物催化劑的可及度。
2.2羅布麻高效脫膠菌群的構(gòu)建
脫膠菌種是生物脫膠最核心的部分，羅布麻相較于苧麻等麻類纖維具有更高的木質(zhì)素含量，這給生物脫膠帶來了很大的阻礙。以往對羅布麻生物脫膠的研究大多使用細(xì)菌，如枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌等芽孢桿菌［6-7，16-17］。隨著紡織生物技術(shù)研究的不斷深入，大量真菌如白腐菌、褐腐菌、軟腐菌也被發(fā)現(xiàn)能降解木質(zhì)素，其中白腐菌是已知唯一能夠?qū)⒛举|(zhì)素徹底降解為二氧化碳和水的生物，已被廣泛應(yīng)用于造紙行業(yè)和生物煉制［18－22］。
微生物菌落的生物多樣性對生態(tài)系統(tǒng)功能的影響，已被試驗證實可以通過選擇特定的微生物組合來設(shè)計菌落，以獲得最大的生態(tài)系統(tǒng)功能速率［23］。本試驗嘗試將黃孢原毛平革菌與枯草芽孢桿菌進(jìn)行混合培養(yǎng)，考察它們的產(chǎn)酶能力和脫膠能力，建立高效復(fù)合脫膠菌群。
2.2.1菌群的生長特性
枯草芽孢桿菌按5％接種量接種，黃孢原毛平革菌按10％接種量接種，以1:2的接種量構(gòu)建復(fù)合菌群，按1.2.2方法分別測試不同生長時期單一枯草芽孢桿菌和黃孢原毛平革菌的生物量以及復(fù)合菌群中它們的生長情況，繪制生長曲線如圖6所示。
圖6 單菌種與復(fù)合菌群生長情況圖
由圖6a可以看出，枯草芽孢桿菌在開始培養(yǎng)的前10h內(nèi)，生物量呈緩慢上升狀態(tài)；10h至17h生物量急劇增長，菌體進(jìn)入對數(shù)生長期；45h后，由于營養(yǎng)物質(zhì)的匱乏導(dǎo)致菌體開始衰亡，生物量呈下降趨勢。與黃孢原毛平革菌組成的復(fù)合菌群生長曲線趨勢和單一枯草芽孢桿菌類似，其進(jìn)入對數(shù)生長期的時間更早，培養(yǎng)6h后生物量開始急劇增長，有更久的穩(wěn)定生長期，且相同時間生物量遠(yuǎn)超單一枯草芽孢桿菌，因此在該菌落中，枯草芽孢桿菌擁有更適宜的生長環(huán)境。
圖6b顯示，黃孢原毛平革菌從第2天開始進(jìn)入對數(shù)生長期，第5天時穩(wěn)定生長，第7天開始進(jìn)入衰亡。不同時間段復(fù)合菌群的生物量相較于單一黃孢原毛平革菌略有提高，兩者整體生長情況近似，表明復(fù)合菌群的環(huán)境對黃孢原毛平革菌的生長沒有太大影響。
2.2.2菌群的酶活
大量研究表明，本試驗所用枯草芽孢桿菌主要產(chǎn)果膠酶、木聚糖酶和葡甘露聚糖酶，其中果膠酶酶活最高［6］。黃孢原毛平革菌是白腐真菌的一種，主要分泌漆酶（LaC）、木質(zhì)素過氧化物酶（LiP）和錳過氧化物酶（MnP），其中LiP和MnP的合成條件較為苛刻，氮源濃度、Mn2＋濃度及含氧量都會對它們產(chǎn)生顯著的影響［24］。因此，為比較復(fù)合菌群與單一菌種的代謝能力，按1.2.3分別測試枯草芽孢桿菌果膠酶酶活、黃孢原毛平革菌漆酶酶活以及復(fù)合菌群的果膠酶和漆酶酶活，結(jié)果如圖7所示。
圖7 菌群的酶活
由圖7可知，枯草芽孢桿菌在生長過程中分泌的果膠酶酶活為0.15U/mL，黃孢原毛平革菌產(chǎn)的漆酶酶活為0.36U/mL，而在復(fù)合菌群中，果膠酶酶活達(dá)到0.21U/mL，提升了40.00％，漆酶酶活同樣也提升了8.33％。在這樣一個復(fù)合脫膠菌落中，產(chǎn)漆酶的能力強于產(chǎn)果膠酶，表明該菌群對木質(zhì)素具有更好的降解效果，復(fù)合菌群中兩種酶的酶活相較于單一菌更強，證明該菌落對兩種菌的生長代謝都有促進(jìn)作用，可以用于生物脫膠。
2.2.3菌群的脫膠能力
為表征各脫膠菌種（群）脫膠能力，參考1.2.4方法分別測試枯草芽孢桿菌、黃孢原毛平革菌和復(fù)合菌群的脫膠能力，如圖8所示。
圖8 不同菌種脫膠效果對比圖
從圖8可以看出，使用單一菌種對羅布麻韌皮纖維進(jìn)行脫膠時，殘膠率都在26.0％，質(zhì)量損失率僅有14.0％～15.0％。枯草芽孢桿菌主要產(chǎn)果膠酶和木聚糖酶，脫膠過程中主要針對果膠、半纖維素以及少量的木質(zhì)素，黃孢原毛平革菌產(chǎn)漆酶（LaC）、木質(zhì)素過氧化物酶（LiP）和錳過氧化物酶（MnP），全部用于降解木質(zhì)素，因此使用單一菌種脫膠時容易造成脫膠不徹底。使用由枯草芽孢桿菌和黃孢原毛平革菌構(gòu)成的復(fù)合脫膠菌群脫膠時，質(zhì)量損失率上升至19.1％，殘膠率下降為19.6％，效果較單一菌種脫膠時提升26.9％，復(fù)合菌群中微生物的協(xié)同作用可以促進(jìn)生物脫膠過程的高效運行。然而羅布麻韌皮纖維生物抗性屏障的存在，使得脫膠效果仍不理想。
2.3抗性屏障破除條件下高效菌群的生物脫膠
為探究羅布麻韌皮纖維抗性屏障的破除對高效脫膠菌群的影響，從菌群的生長情況和脫膠能力兩個方面進(jìn)行比較。
2.3.1抗性屏障破除條件下高效菌群生長情況
羅布麻韌皮纖維中含有黃酮、鞣質(zhì)等抑菌物質(zhì)，在脫膠過程中不利于微生物生長繁殖，為比較超臨界CO2處理對這類抑菌物質(zhì)的影響，將預(yù)處理前后的羅布麻韌皮纖維粉末作為主要營養(yǎng)物質(zhì)培養(yǎng)高效復(fù)合菌群，按1.2.2測試不同階段的生物量，繪制生長曲線如圖9所示。
圖9 超臨界CO2處理前后菌群生長情況
由圖9可知，經(jīng)過預(yù)處理后菌群的生物量相較于不做處理的原麻顯著提升。在用超臨界CO2進(jìn)行處理時，不僅羅布麻韌皮纖維內(nèi)部的形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化，以此提高了生物催化劑的可及度，使微生物更容易進(jìn)入到纖維內(nèi)部，獲得更多的營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行生長繁殖，它的分子結(jié)構(gòu)同樣發(fā)生了改變，黃酮等抑菌物質(zhì)在此過程中被萃取出來，此時的羅布麻韌皮更適宜微生物的繁殖，因此菌株的生長更為迅速，在后續(xù)脫膠過程中更有利于脫膠菌的生長繁殖。
2.3.2抗性屏障破除條件下高效菌群脫膠效果
為探究抗性屏障對高效菌群脫膠能力的影響，對超臨界CO2處理前后的羅布麻韌皮纖維用高效菌群進(jìn)行脫膠，參考1.2.4的方法進(jìn)行表征，結(jié)果如圖10所示。
圖10 超臨界CO2處理前后脫膠效果對比圖
由圖10可知，未經(jīng)預(yù)處理的羅布麻原麻直接進(jìn)行脫膠，殘膠率較高，經(jīng)過超臨界CO2處理后脫膠，殘膠率為10.8％，效果顯著提升。由于羅布麻韌皮纖維天然生物25.0抗性屏障的存在，使得脫膠菌很難滲透進(jìn)纖維內(nèi)部，導(dǎo)致脫膠不徹底，且纖維內(nèi)部的抑菌物質(zhì)也會抑制微生物生長，不利于生物脫膠；超臨界CO2預(yù)處理不僅可以利用CO2氣體使纖維內(nèi)部膨脹松散開，改變韌皮內(nèi)部的孔隙結(jié)構(gòu)，破除生物抗性屏障，提高生物催化劑的可及度，在此過程中還伴隨著果膠、木質(zhì)素的少量去除［25］，減輕后續(xù)生物脫膠的壓力，還能萃取出相當(dāng)?shù)狞S酮等抑菌物質(zhì)，有利于脫膠菌的生長代謝，提高脫膠效率。
3結(jié)論
3.1超臨界CO2處理能有效地破除羅布麻韌皮纖維的抗性屏障，萃取出纖維內(nèi)的抑菌物質(zhì)，使得纖維孔徑增大，結(jié)晶度降低，提高生物催化劑的可及度。
3.2復(fù)合菌群對枯草芽孢桿菌和黃孢原毛平革菌的生長和產(chǎn)酶能力都有促進(jìn)作用，復(fù)合菌群的脫膠能力也優(yōu)于任意單一菌種。
3.3生物抗性屏障被破除后的羅布麻更適合高效復(fù)合脫膠菌群的生長繁殖，對纖維進(jìn)行處理后脫膠，脫膠效果提升8.0％～9.0％。
參考文獻(xiàn)
［1］張衛(wèi)明，肖正春，張廣倫，等.新疆羅布麻生態(tài)類型及其纖維品質(zhì)研究［J］.中國野生植物資源，2006（4）：33－37.
［2］GRUNDMANN O， NAKAJIMA J I，KAMATA K， et al. Kaempferol from the leaves of apocynum venetum possesses anxiolytic activities in the elevated plus maze test in mice ［ J ］ . Phytomedicine ， 2009，16（4）：295－302.
［3］LI M， HAN G， CHEN H， et al. Chemical compounds and antimicrobial activity of volatile oils from bast and fibers of apocynum venetum ［J］.Fibers and Polymers，2012，13（3）：322－328.
［4］XU X， GONG J， ZHANG T， et al. Insights into antibacterial mechanism of apocynum venetum L. fiber： evolution of bioactive natural substances in bast dur ing chemical degumming process ［J］.In- dustrial Crops and Products，2020（151）：112419.
［5］李明華.羅布麻纖維抑菌成分與抑菌性能的研究［D］.上海：東華大學(xué)，2011.
［6］張濤.基于抗性屏障結(jié)構(gòu)破除的羅布麻纖維生物脫膠研究［D］.天津：天津工業(yè)大學(xué)，2019.
［7］張秋亞.羅布麻纖維仿生集成脫膠研究［D］.天津：天津工業(yè)大學(xué)，2017.
［8］WANG L， HAN G， ZHANG Y. Com-parative study of composition， structure and properties of apocynum venetum fibers under different pretreatments ［J］. Carbohydrate Polymers，2007，69（2）：391－397.
［9］鞏繼賢，張秋亞，張濤，等.韌皮結(jié)構(gòu)對羅布麻生物脫膠的影響［J］.紡織學(xué)報，2017，38（12）：83－87.
［10］PAMIDIPATI S， AHMED A. A first report on competitive inhibition of lac- case enzyme by lignin degradation in- termediates［J］.Folia Microbiol （Praha），2020，65（2）：431－437.
［11］王磊磊.羅布麻纖維結(jié)構(gòu)及成分初探［D］.青島：青島大學(xué)，2007.
［12］劉颋，曹貴平，劉濤，等.高壓CO2對聚丙烯溶脹行為的影響［J］.高分子材料科學(xué)與工程，2005（6）：130－133.
［13］高世會.羅布麻韌皮纖維超臨界CO2協(xié)同生物化學(xué)脫膠研究［D］.上海：東華大學(xué)，2016.
［14］朱國華，俞建勇.亞麻脫膠后纖維的縱向結(jié)構(gòu)和強力的研究［J］.上海紡織科技，2004（3）：11－12.
［15］LOJEWSK J， MISKOWIEC P，LOJEWSKI T， et al. Cellulose oxidative and hydrolytic degradation： in situ FTIR approach［J］.Polymer Degradation ＆ Stability，2005，88（3）：512－520.
［16］鄭權(quán)莉，鞏繼賢，李輝芹，等.微生物處理條件下羅布麻脫膠動態(tài)過程分析［J］.針織工業(yè)，2015（1）：41－44.
［17］楊琦，段盛文，彭源德.苧麻微生物脫膠技術(shù)的研究進(jìn)展［J］.中國麻業(yè)科學(xué)，2018，40（1）：36－42.
［18］朱麗平.白腐菌高效降解竹材木質(zhì)素的工藝條件研究［D］.重慶：重慶大學(xué)，2009.
［19］龔國利，陳志宣，陳松，等.高產(chǎn)漆酶白腐真菌的分離與鑒別［J］.陜西科技大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2012，30（6）：79－83.
［20］SHINDE S D， MENG X， KUMARR， et al. Recent advances in under- standing the pseudo －lignin formation in a lignocellulosic biorefinery ［ J ］. Green Chemistry，2018，20（10）：2192－2205.
［21］張超，張曉暉，王家璽，等.木質(zhì)素生物煉制研究進(jìn)展［J］.氨基酸和生物資源，2016，38（4）：60－70.
［22］林海龍.木質(zhì)纖維素生物煉制的研究進(jìn)展［J］.生物加工過程，2017，15（6）：44－54.
［23］BELL T， NEWMAN J A， SILVER-MAN B W， et al. The contribution of species richness and composition to bac terial services［J］.Nature，2005，436（7054）：1157-1160.
［24］李華鐘，章燕芳，華兆哲，等.黃孢原毛平革菌選擇性合成木質(zhì)素過氧化物酶和錳過氧化物酶［J］.過程工程學(xué)報，2002（2）：137－141.
［25］SEGHINI M C， TOUCHARD F，CHOCINSKI－ARNAUIT L， et al. Envi- ronmentally friendly surface modification treatment of flax fibers by supercritical carbon dioxide［J］.Molecules（Basel， Swit- zerland），2020，25（3）：438.
文章摘自：羅子都，任遠(yuǎn)，李政，鞏繼賢基于抗性屏障破除的羅布麻高效菌群脫膠研究針織工業(yè)［J］2022年第6期
